特别提示:包括RNA/DNA ROY LAMP MasterMix(红黄变色)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:RNA/DNA ROY LAMP MasterMix(红黄变色)
英文名称:2×RNA/DNA ROY LAMP Mix
产品货号:MT2401
产品规格:20μL×100T
本制品对DNA或RNA样本均可进行变色LAMP扩增。制品中包含Bst DNA聚合酶4.0,可高效的的完成LAMP及RT-LAMP扩增反应,无需再添加任何其它试剂。优化的反应体系,确保快速的完成检测试剂的反应体系建立。ROY系列产品为红黄变色反应,扩增完毕后阳性样品为黄色,阴性样品为红色,可直接通过肉眼观察结果。
LAMP是一种新型的滚环扩增技术,在恒温条件下,呈指数级别放大核酸分子,30分钟内将DNA放大10
9~10
10倍。其快速、恒温的独特技术优势,使得LAMP技术成为开发诊断试剂的明星潜力技术。由于在LAMP扩增中用到很高浓度的引物,因此难免保证有少量错配和引物Dimer,这些轻微的污染都会导致LAMP高速的扩增中造成假阳性检测。本公司依托独特的显色技术和阴性控制技术建立了全新的LAMP检测平台。
产品组成:
组分 |
规格 |
2×RNA/DNA ROY LAMP MasterMix |
1ml |
保存条件:-20℃,保存2年。
使用方法:
- 配制反应体系
在0.2ml EP反应管中加入下述试剂
成分 |
用量 |
2×RNA/DNA ROY LAMP MasterMix |
10μl |
10×LAMP Primer Mix |
2μl |
模板RNA/DNA |
X μl |
ddH2O |
至20μl |
10×LAMP Primer Mix浓度:FIP/BIP分别为16μM、LoopF/B分别为4μM、F3/B3分别为2μM
- 反应设置
反应体系配好后,置于60~68℃(首次实验采用65℃)进行反应20~45min。
- 观察结果
肉眼观察结果,黄色为阳性,红色为阴性。
注意事项:
红黄变色反应依赖于反应体系中pH的变化来实现,因此模板中Tris盐、NaOH等成分对反应有至关重要的影响。在采用核酸纯化的样本检测时,推荐使用ddH2O进行洗脱,在使用粗制样本时建议使用ddH2O保存的样本进行检测。除此外,可使用我公司精心研制的LAMP专用快速核酸释放剂。
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RNA/DNA ROY LAMP MasterMix(红黄变色),RNA/DNA LAMP预混反应液,您可能还对以下产品有需求:
名称:可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂
货号:BTN60901
规格:0.3mL
Taq DNA聚合酶是进行PCR的最常用工具酶,但是由于它在常温下还是具有部分活性,所以经常会出现非特异的扩增产物,尤其是当PCR反应体系中有大量非特异DNA存在的时候。目前最常见的解决方法是使用抗Taq DNA聚合酶的抗体和使用经过化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶(如AmpliTaq Gold),但前者的缺点是加热后抗体会不可逆失活,后者的缺点是需要预热处理使酶激活。
产品特点:
1.可逆抑制Taq DNA聚合酶的活性,即常温抑制Taq酶活性,在45℃以上抑制功能丧失,当温度降低到45℃以下后,抑制活性又得以恢复。
2.耐热,产品本身为非蛋白质试剂,远比Anti-Taq抗体稳定,便于保存和运输。
3.使用简单,在加Taq酶前将本产品按PCR反应体积的1/10直接加入即可。
4.适用范围广,除Taq DNA聚合酶外,还可用于抑制其他DNA聚合酶的活性,如:Tth pol、Stoffel片段、Tfl pol、Tbr pol等。而一种酶的抗体一般对另一种酶的活性没有抑制作用。
5.与后续的RT-PCR兼容。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
在加入Taq或Tth DNA聚合酶之前,按PCR反应终体积1/10的比例将本产品加入到反应体系中混匀,然后再加入DNA聚合酶,启动PCR反应。
名称:2×PCR Master Mix (含蓝色染料)
货号:YT382
规格:400次|2000次|10000次
本品是含有蓝色染料(电泳位置约300-500bp)的2倍浓度的PCR预混液,含有2X Taq DNA Polymerase、2X PCR Buffer、2X dNTP和2X Loading Buffer,只需加入模板DNA、引物和水即可进行PCR扩增,并且扩增完毕后可以直接上样电泳。主要适用于cDNA或基因组DNA等的常规PCR扩增,特别适合于定性或半定量的PCR扩增,也可用于长度小于2kb的DNA片段的扩增和克隆。
本品中已经含有所有的通用组分,用户只需自备引物、模板DNA和水即可进行PCR扩增。大大简化了PCR操作,使操作更加快捷,也减少了PCR操作过程中可能导致的污染,使PCR的重复性更好。可以扩增出长达8kb的片段,但通常更适合用于扩增2kb以下的DNA片段。
本产品中加入了蓝色的电泳示踪染料,其在浓度为1%琼脂糖胶中的迁移位置大约位于300bp和500bp之间。PCR结束后可直接进行电泳检测,无需再添加上样缓冲液。蓝色示踪染料不会影响对相应DNA条带的观察和检测。
本产品稳定性高,经测试,反复冻融15次后对PCR的扩增效果无显著影响。反复冻融15次前后,使用不同引物扩增100-1500bp间不同长度目的片段的效果如下图所示。
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本产品反复冻融15次前后扩增不同长度产物的效果图。A. 反复冻融前本产品进行PCR的扩增结果。B.反复冻融15次后的本产品进行PCR的扩增结果。除本产品是否反复冻融15次外,A和B的反应体系完全相同,电泳的上样量也相同。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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