小细胞肺癌细胞NCl-H446(CTCC-003-0006)
规格:T12.5*2
产品描述:
种属:人源
组织来源:肺癌
疾病:癌症
年龄:61岁
性别:男
细胞类型:表皮细胞
生长特性:贴壁和悬浮
拆包 & 存储
1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液
2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出,并按照下方操作步骤进行培养传代
注意:如为冻存管,请收到后立即解冻培养
培养瓶中细胞操作步骤
对于贴壁培养的细胞,寄送前,我们会将培养基充满整个培养瓶,以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
1.收到细胞产品后,请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸,且有些细胞对温度变化也很敏感,可能存在一些细胞脱落漂浮的情况,这些细胞仍是活细胞,请勿丢弃,可离心富集后传代使用。
2.对于贴壁培养的细胞,在生物安全柜环境中,用真空泵去除培养瓶中的多余培养基,至剩余5-8mL左右,随后将细胞置于含有5%CO2的37°C恒温培养箱中培养。如果细胞已经长满培养瓶,请立即传代。3.对于悬浮培养的细胞,在生物安全柜环境中,转移培养瓶中的细胞至离心管中,离心200×g/5-10min,去除上清后,用5mL培养基吹散细胞,转移至新的培养瓶中,随后置于含有5%CO2的37°C恒温培养箱中培养。
冻存细胞操作步骤
注意:为保存细胞的高存活率,请收到产品后,立即解冻培养。
1.将冻存管置于37°C水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染,确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中, 离心200×g/5-10min,用真空泵去除含有冻存液的上清。
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率,请将培养基在37°C水浴预热后使用。
5. 将细胞置于含有5%CO2的37°C恒温培养箱中培养。
贴壁细胞传代培养
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基。
2. 加入1.0 mL0.25(w/v)Trypsin-0.53mM EDTA溶液,并置于37°C培养箱中孵育,直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟(此处为12.5 cm2培养瓶所用体积,可根据实际情况增减用量)。3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶,并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落,并使细胞分散。
4. 离心200xg/5min,去除上清后,取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中,并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。
5. 将细胞置于含有5%CO2的37°C恒温培养箱中培养。传代比例:建议 1:3至1:9培养基换液: 每隔2 至 3 天。
细胞冻存液
细胞冻存液,请使用产品: Cryo Frozen Medium (Cat#CTCC-002-002)
注意事项:
储存温度:液氮中保存
生物安全等级:1级
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