琼氏不动杆菌的特征与优势及保存方法！

                                  琼氏不动杆菌的特征与优势及保存方法！
 
琼氏不动杆菌，非模式菌株，主要用途为研究、教学。烷烃降解，30℃下生长，以十八烷烃为唯一碳源。
 
一、菌种简介
平台编号：bio-05745
提供形式：冻干物
拉丁属名：Acinetobacter junii
中文译名：琼氏不动杆菌
属名：Acinetobacter
种名加词：junii
拉丁学名：Acinetobacter junii
原始编号：NH88-14
菌株来源：←宁波大学
保藏人：张德民
直接来源国家：中国
保藏时间：10/13/2008
生物危害：四类
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究、教学
具体用途：教学科研
培养温度：30℃
培养基：0223    
其他培养条件
分离源：三疣梭子蟹养殖塘水
采集地点：浙江省宁海县明港东坝
采集国家：中国
资源保藏类型：培养物
保存方法：其他
共享方式：合作研究共享
提供形式：斜面培养物
 
二、菌种特征特性
烷烃降解,30℃下生长,以十八烷烃为唯一碳源。革兰氏染色阴性，杆状，静止期呈球形，常成对，也可呈不同长度的链状，无芽孢； 菌落特征：LB培养基上呈圆形，隆起，菌落淡黄，不透明，边缘光滑平整，湿润，30℃下生长良好。
1-丁基-3-甲基六氟磷酸盐咪唑啉嗡/1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐/1-丁基-3-甲咪唑六氟磷酸盐/1-丁基-3-甲基六氟磷酸盐咪唑嗡/1-正丁基-3-甲基咪唑鎓六氟磷酸盐/1-丁基-3-甲基六氟磷酸盐咪唑/1-正-丁基-3-甲基咪唑鎓六氟磷酸盐/BMIMPF6。
 
三、产品优势
1、产品质量稳定，是为科研和生产提供微生物菌种资源共享服务的专业平台。
2、国内首创封闭管包装，冻干后的菌株使用时添加配套的复苏培养基后迅速而完全溶解。针对不同的菌株提供八种不同的培养方法，保证菌种的复苏质量。
3、严格的质检程序，确保产品质量的稳定性。
4、该类产品广泛使用到食品、药品、化妆品、水产品、化工等行业，疾控中心、质检局、出入境、药检局等等，得到广泛好评。
5、上海沪峥产品性价比适中，从销售到售后，给您完善的服务。
 
四、保存方法
1、传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。
2、悬液保存法：
①蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
②糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
3、载体保存法：土壤保存法；砂土保存法；硅胶保存法；磁珠保存法；麸皮保存法；纸片(滤纸)保存法。
4、常用的冷冻保存法：
①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。
②干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。
③液氮保存法(-196℃)：是适用范围微生物保存法。​
 
五、实验内容
1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2、干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3、高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4、过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
 
六、微生物菌种的培养
1、孢子制备
⑴放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。
⑵霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。
2、种子制备
⑴摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。
⑵种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。
 
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