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肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒价格优惠,质量保证。
上海梵态生物长期专业供应ELISA试剂盒,产品种类齐全,包括人、大小鼠、牛羊马猴等各种种属的ELISA试剂盒。本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平
肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的抗原会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与结合在包被抗体上的抗原结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,抗原浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中指标的浓度。试剂盒组成
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
说明书 | 1份 | 1份 |
封板膜 | 2片 | 2片 |
密封袋 | 1个 | 1个 |
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 |
标准品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 |
酶标试剂 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
终止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
20×浓缩洗涤液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 |
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
说明书 | 1份 | 1份 |
封板膜 | 2片 | 2片 |
密封袋 | 1个 | 1个 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒操作步骤
1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。
4. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
7. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
8. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
9. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
试验所需自备物品
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
4. 吸水纸
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