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疾病控制中心作业指导书
标题:BIOTEK 50TMTS洗板机
1.适用范围:本仪器用于使用ELISA法检测酶标板的洗涤。
2.技术特性
2.1使用环境:要求桌面平整、无震动。
2.2主要技术参数:孔板类型: 24, 96孔板和板条
震荡: 自定义震荡、强度时间,最高30分钟,5种强度可选
浸泡时间: 自定义,最高至30分钟
分离方式: 磁珠分离,真空抽滤(依型号而定)
操作界面: 4.3”彩色LCD 触摸屏
机载软件: 75个客户定义程序
快速菜单
创建或编辑用户程序
运行机载程序或导入LHCTM 软件程序
软件: 可选Liquid Handling Control TM软件用于电脑操作
二、操作方法
1 - 打开仪器旁边的电源,仪器自动进行初始化和系统自检。
2 - 自检结束后,仪器自动显示Main Menu(主界面)。
3 - 洗板前,先进行冲洗程序,清洗管道,方法为:以配好的洗液,运行 quick程序,进行清洗。建议重复运行三次。
4 - 如需新建一个Wash(洗板)程序,依次按下Protocol Definition(定义)→CREATE(新建)→Wash (洗板)进行定义。出现NAME(名称),输入洗板程序的名称,按ENTER 键,出现 Method(方式),详见第6 条;和Dispense(分液)和Aspiration(吸液),一般无需更改,如需变动,参照具体说明。
例如建立一个HIV洗板程序:开机→MAIN→Protocol→Create→name(HIV) →SAVE→Add a step(wash) →Add a step(aspirate) →exit(home)。
5 - 在Method(方式)选项中,设定以下参数:
选择 动作
Number of Cycles(洗板次数) 设置洗板循环次数,1~10 次
Wash Strip(洗板条数) 定义洗板Strip(条)
Soak/Shake(浸泡/振荡) 如果要浸泡就选择Yes,进一步编辑如下选项;否则选择No,全部编辑完全。
Soak Duration (浸泡时间) 浸泡时间范围0~600 秒,一般选择30 或60 秒
Shake Before Soak?(浸泡前 选择是否在浸泡前震荡,如选择YES,则需进一步设定
疾病控制中心作业指导书 文件编号:
标题:BIOTEK 50TMTS洗板机 第 2 页 共 2 页
是否振荡?) 下列参数,否则选择No 完成洗板程序设置。
Shake Duration(振荡时间) 设置震荡时间
Shake Intensity(振荡强度) 设定酶标板震荡强度,1 最弱,5 最强
Prime After Soak?(浸泡后是否灌注?) 选择是否在浸泡完成后填充液体
Prime Volume(灌注体积) 选择填充量
Prime Flow Rate(灌注流速) 选择真空泵抽吸速度。1 最慢,9 最快
全部设定完毕后,按Main Menu(主菜单)保存,显示 OK to save the Program, 选择 YES,保存程序即可。
6 - 按“Main”回到主界面下,运行HIV程序,开机→MAIN→HIV→WASH Strip→START。
9 - 洗板结束,按 Main Menu 按钮回到主界面,运行quick 程序,进行清洗。重复运行三次。
三、注意事项
1 - 检查洗液瓶,洗液瓶的洗液要足够多,最好超过三分之二,防止在洗板中途用尽。快用尽时,可拧开瓶盖,添加洗液,但是要注意,洗瓶内吸管不能离开液面,防止进气。
2 - 每天实验结束时,倒空废液,防止污染。
6.洗板机的自检自校
6.1机械检查:开机,置96孔酶标板于洗板机上按仪器操作规程(SOP)进行洗板,检查洗板机管道是否畅通,有无漏液现象,检查程序是否运转正常,洗涤时各孔与相应冲洗头对位是否良好,负压是否正常。
6.2 吸光度检查:酶标板,于每孔加入100ul蒸馏水。于第一列每孔加入100ul 100mg/ml浓度的重铬酸钾溶液100ul ,混匀后吸100ul置下一列各孔中,如此倍比稀释至1:2048,稀释度依次为1:2、
1:4、 1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256、1:512、1:1024、1:2048,置稀释好的96孔板于酶标仪上,在450nm下测吸光度OD值。将此96孔板置洗板机上常规洗板后,每孔加入100ul蒸馏水,再次置于酶标仪上于450nm波长下测吸光度OD值。比较洗板前后相应各孔吸光度值变化情况,判断洗板机工作是否良好。
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