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双光子/三光子显微“关键器件”

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在高光子密度的情况下，荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子，在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后，发射出一个波长较短的光子。配合相应波长的荧光染料或荧光蛋白则可实现双光子荧光显微。双光子显微镜的优势在于：

1. 漂白局限于焦点处：因为荧光激发只发生在物镜的焦点上，所以相对于激光共聚焦显微技术就不需要共聚焦针孔了。这样提高了光的检测，而且光漂白只发生在焦点上。焦点外的光漂白和光损伤很小。

2. 提高信噪比。激发光波长和发射光波长具有很大的差别，提高了信噪比。

3. 更容易穿透标本：红外波长的光不易被细胞散射，能穿透更深的标本。

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