极超灵敏ECL化学发光试剂盒

特别提示：包括极超灵敏ECL化学发光试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：极超灵敏ECL化学发光试剂盒
英文名称：BeyoECL UT Kit For Western Blot
产品货号：YTB061
产品规格：100mL|500mL

本试剂盒是用作Western萤光检测试剂的一种极超敏的以luminol为基础的ECL化学发光试剂盒，发光效果显著优于BalbECL Star，可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。

百奥莱博生产的Western萤光检测试剂目前共有三种，分别是YT060 BalbECL Plus、YT061 BalbECL Star和YTB061 BalbECL UT。常规的Western检测，优先推荐使用BalbECL Star。对于丰度比较高的目的蛋白的检测，例如内参蛋白等的检测，推荐使用性价比更高的BalbECL Plus。对于低丰度较难检测的目的蛋白，优先推荐使用检测灵敏度最高的BalbECL UT。但对于丰度适中的目的蛋白的检测，不太推荐使用BalbECL UT，因为使用BalbECL UT时由于检测灵敏度特别高，容易产生过曝的现象。

BalbECL UT灵敏度极高，Western blot检测效果与Thermo公司SuperSignal West Dura相当或略佳(参考图1)，化学发光效果在1小时内显著优于Thermo公司的SuperSignal West Dura，30分钟内发光效果可达SuperSignal West Dura的约1.8-3.6倍，BalbECL Star的4.2-6.9倍(参考图2)。


图1.BalbECL UT和Thermo公司SuperSignal West Dura及百奥莱博的BalbECL Star的Western blot的检测效果对比图。Western检测过程中仅发光试剂不同，其余完全相同。图中可见，百奥莱博的BalbECL Star的检测灵敏度大约为SuperSignal West Dura的50%左右，而BalbECL UT的检测灵敏度与SuperSignal West Dura相当或略佳。

BalbECL UT的发光强度高。20微升25pg/μl辣根过氧化物酶标记IgG中，加入100μL百奥莱博的BalbECL UT工作液等三种不同的发光液后，在不同时间点通过化学发光仪(luminometer)检测化学发光。检测数据显示在1小时内BalbECL UT的发光效果总是最强的，BalbECL Star和SuperSignal West Dura的发光比较稳定，但发光强度要弱不少(图2)。


图2.BalbECL UT和Thermo公司SuperSignal West Dura以及百奥莱博的BalbECL Star的检测效果对比。相同量的HRP-IgG(500pg)，与发光试剂混合后至图中指定时间检测化学发光。图中可见BalbECL UT在1小时内发光效果显著优于SuperSignal West Dura和BalbECL Star。

BalbECL UT的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量，以免获得过深的难以比较灰度的条带。

BalbECL UT非常稳定。BalbECL UT和BalbECL Star一样，37℃水浴孵育30天，和4℃保存的试剂相比，对相同样品的检测效果无任何明显差异。

BalbECL UT的背景很低，对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。PVDF膜(YTB1201/YTB1202/YTB1204/YTB1205/YTB1206)和硝酸纤维素膜(YTB1203/YTB1207)可以向百奥莱博订购。

试剂盒组成：

组分	100mL	500mL
BalbECL UT A液	50mL	250mL
BalbECL UT B液	50mL	250mL

保存条件：
4℃避光保存，一年有效。37℃避光保存，一个月内有效。如果长期不用，可以-20℃避光保存，这样可以保存更长时间。

注意事项：
1．BalbECL UT A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。
2．各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。特别是B液，含有氧化剂，比较容易被还原而失效。
3．BalbECL UT的萤光持续时间很长，但开始反应后的20-30分钟内萤光更强一些，随后萤光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这萤光较强的30分钟进行压片或成像。
5．当发现BalbECL UT的检测灵敏度过高而影响检测效果时，可以选择检测灵敏度较低一些的BalbECL Star(YT061)或BalbECL Plus(YT060)，或者减少样品、一抗或二抗的用量。
6．BalbECL UT A液和B液均对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
7．本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
8．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1．Western实验步骤可以参考百奥莱博的相关网页：http://www.bjbalb.com/article.aspx?dd=53
2．BalbECL UT工作液的配制：等体积混合适量BalbECL UT A液和B液，室温放置备用。工作液宜在临检测前配制。
3．Western二抗孵育后，并进行数次洗涤后，用WB专用镊子(YTB1301)将膜取出，用吸水纸略吸去过多的液体(切勿接触膜的蛋白面)，然后置于一洁净保鲜膜上。
4．根据膜的大小，按每10平方厘米膜加1mlBalbECL UT工作液的比例，滴加BalbECL UT工作液到膜上，确保使工作液均匀覆盖在膜上，放置1-2分钟。
5．取膜，弃BalbECL UT工作液，用吸水纸略吸去过多的液体。将膜放在两片保鲜膜中间，随后进行压片检测或化学发光成像仪检测。
6．压片检测：将膜固定于片夹内。暗室内压片1分钟，立即显影定影，根据结果再调整压片时间。或直接分别压片30秒、1、3、5分钟，然后一起显影定影观察结果。

根据您的关注的极超灵敏ECL化学发光试剂盒，您可能还对以下产品有需求：



名称：抗荧光淬灭封片液(强)
货号：YT098
规格：5ml
本品是一种用于减缓荧光淬灭的封片试剂。可以用于减缓各种常见荧光染料的荧光淬灭。本抗荧光淬灭封片液在使用前需把抗荧光淬灭试剂加入到抗荧光淬灭试剂溶剂中，充分溶解并混匀后即可使用。配制好的抗荧光淬灭封片液可-20℃避光保存至少3个月。操作简单，在封片时用移液器滴一滴配制好的抗荧光淬灭封片液在样品上，盖上盖玻片即可完成操作。按照每个样品封片需要50微升计算，足够用于100个样品的封片。

注意事项：
1. 荧光物质均易发生淬灭，染色后的样品宜避光保存。
2. 在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光。
3. 需把抗荧光淬灭试剂一次性全部加入到抗荧光淬灭试剂溶剂中，充分溶解并混匀后方可使用。

名称：FITC抗小鼠免疫荧光染色试剂盒
货号：YT117
规格：>300次
本试剂盒含有FITC标记的山羊抗小鼠IgG(H+L)抗体，可以用于检测小鼠来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的绿色。FITC是一种常用的绿色荧光探针。FITC的吸收峰492nm、发射峰520nm。本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

试剂盒组份：
抗小鼠FITC———————————30μl
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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