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| 销售商： 上海博湖生物科技有限公司销售部 | 查看该公司所有产品 >> |
以下是PCR鉴定试剂盒订购信息：
产品名称：地榆探针法PCR鉴定试剂盒
英文名称：Radix sanguisorbae
产品规格：50次
运输：低温
保存：负20度
有效期：一年
货期：现货
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品及特点：
本产品是一管式超快植物种子和叶片基因组DNA 提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染。常温运输及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化，适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶片和种子。
使用及效果：将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
应用案例
样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20 μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分.
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
产品名称：地榆探针法PCR鉴定试剂盒
英文名称：Radix sanguisorbae
产品规格：50次
运输：低温
保存：负20度
有效期：一年
货期：现货
储存条件：14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品及特点：本产品是一管式超快植物种子和叶片基因组DNA 提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染。常温运输及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化，适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶片和种子。
使用及效果：将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
应用案例
样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20 μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分.
马烯雌酮 Equilin 6.25 200 pg/mL 1
神经型一氧化氮合成酶 Neuronal nitric oxide synthase 1.5 48 U/L 0.1
金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 2.5 80 ng/ml 0.1
基质细胞衍生因子1β Stromal cell derived factor 1β 0.25 8 ng/mL 0.1
基质细胞衍生因子1α Stromal cell derived factor 1α 62.5 2000 pg/mL 10
锌转运蛋白8 Zinc transporter 8 0.5 16 ng/mL 0.1
抗RA33IgG抗体 Anti-RA33-IgGantibody 5 160 ng/mL 1
杆状病毒 Baculoviridae 0 10
雌激素受体 Estrogen Receptor 25 800 pg/mL 1
半胱氨酸蛋白酶10 Caspase 10 2.5 80 mU/mL 0.1
和肽素 copeptin 62.5 2000 pg/ml 10
卵泡抑素 Follistatin 2.5 80 ng/mL 0.1
基质金属蛋白酶9 matrix metalloproteinase 9 3.125 100 U/L 0.1
碳酸酐酶 carbonic anhydrase 2.5 80 ng/mL 0.1
和肽素 copeptin 6.25 200 ng/mL 1
血管生成素14 Angiopoietin 14 6.25 200 ng/mL 1
丝氨酸脱水酶 Serine Dehydratase 0.625 20 ng/mL 0.1
Methyl undecanoate分子式：C12H24O2分子量：200.32
Undecanoic acid methyl ester
11-十二烯酸 54921-60-7
7-OXO-11-DODECENOIC ACID分子式：C12H20O3分子量：212.291
备注：
蜂蜡酸甲酯 629-83-4
Triacontanoic Acid Methyl Ester分子式：CH3(CH2)28COOCH3分子量：466.82
三十酸甲酯备注：
二十七碳酸甲酯 55682-91-2
地榆探针法PCR鉴定试剂盒Heptacosanoic acid methyl ester备注：
Methyl heptacosanoate分子式：CH3(CH2)25COOCH3分子量：424.74
蜡酸甲酯 5802-82-4
Methyl hexacosanoate分子式：CH3(CH2)24COOCH3分子量：410.72
Hexacosanoic acid methyl ester备注：
二十五碳酸 506-38-7
Pentacosanoic acid分子式：C25H50O2分子量：382.66
备注：
地榆探针法PCR鉴定试剂盒PCR反应的特异性决定因素为：神经型一氧化氮合成酶 Neuronal nitric oxide synthase 1.5 48 U/L 0.1
金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 2.5 80 ng/ml 0.1
基质细胞衍生因子1β Stromal cell derived factor 1β 0.25 8 ng/mL 0.1
基质细胞衍生因子1α Stromal cell derived factor 1α 62.5 2000 pg/mL 10
锌转运蛋白8 Zinc transporter 8 0.5 16 ng/mL 0.1
抗RA33IgG抗体 Anti-RA33-IgGantibody 5 160 ng/mL 1
杆状病毒 Baculoviridae 0 10
雌激素受体 Estrogen Receptor 25 800 pg/mL 1
半胱氨酸蛋白酶10 Caspase 10 2.5 80 mU/mL 0.1
和肽素 copeptin 62.5 2000 pg/ml 10
卵泡抑素 Follistatin 2.5 80 ng/mL 0.1
基质金属蛋白酶9 matrix metalloproteinase 9 3.125 100 U/L 0.1
碳酸酐酶 carbonic anhydrase 2.5 80 ng/mL 0.1
和肽素 copeptin 6.25 200 ng/mL 1
血管生成素14 Angiopoietin 14 6.25 200 ng/mL 1
丝氨酸脱水酶 Serine Dehydratase 0.625 20 ng/mL 0.1
Methyl undecanoate分子式：C12H24O2分子量：200.32
Undecanoic acid methyl ester
11-十二烯酸 54921-60-7
7-OXO-11-DODECENOIC ACID分子式：C12H20O3分子量：212.291
备注：
蜂蜡酸甲酯 629-83-4
Triacontanoic Acid Methyl Ester分子式：CH3(CH2)28COOCH3分子量：466.82
三十酸甲酯备注：
二十七碳酸甲酯 55682-91-2
地榆探针法PCR鉴定试剂盒Heptacosanoic acid methyl ester备注：
Methyl heptacosanoate分子式：CH3(CH2)25COOCH3分子量：424.74
蜡酸甲酯 5802-82-4
Methyl hexacosanoate分子式：CH3(CH2)24COOCH3分子量：410.72
Hexacosanoic acid methyl ester备注：
二十五碳酸 506-38-7
Pentacosanoic acid分子式：C25H50O2分子量：382.66
备注：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
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