自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件
14℃或-20℃
特点:
1.产品仅用于科研即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果
【结果分析条件设定】
u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct;
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35;
3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性:有明显的指数扩增期,且Ct<38;
2.可疑:有明显的指数扩增期,且38≤Ct<40,此时样本为可疑样本;对于可疑样本建议复核一次,若复核结果Ct<40且有指数扩增期,则判定为阳性,否则判定为阴性;
3. 阴性:无指数扩增期,Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果;
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,可能会导致出现假阴性结果。
地龙探针法PCR鉴定试剂盒注意事项:
建议加样顺序是阴性质控品、待检样本、阳性质控品。4. PCR扩增(扩增区)
1) 仪器设置(以ABI Prism 7500为例)
将PCR反应管放入PCR仪内,按照对应顺序设置阴性质控品(NTC)、阳性质控品(Standard)及待检样本(Unknown)。Reporter Dye为FAM,Quencher Dye为None,参比染料(Passive Reference)为 None。
2 ) 扩增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集荧光信号,反应体系为25 μl。
25羟基胆固醇 25-hydroxycholesterol 6.25 200 pg/mL 1
促性腺激素释放激素 gonadotropin-releasing hormone 10 320 pg/mL 1
血清总补体 50% complement hemolysis 25 800 μg/mL 1
叶黄素 Lutein 0.25 8 ng/mL 0.1
生长因子受体 growth factor receptor 125 4000 pg/mL 10
粒细胞集落刺激因子抗体 Granulocyte Colony Stimulating Factor antibody 37.5 1200 pg/mL 1
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体 Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor antibody 12.5 400 pg/mL 1
白细胞介素5 Interleukin 5 5 160 pg/mL 1
口疮病毒 Orf virus 0.25 8 ng/ml 0.1
垂体中叶素 Intermedin 62.5 2000 pg/mL 10
黄素单加氧酶 flavin monooxygenase 3.125 100 mU/mL 0.1
碱性成纤维细胞生长因子 basic fibroblast growth factor 6.25 200 pg/mL 1
血小板衍化生长因子 Platelet-Derived Growth Factor 20 640 ng/mL 1
核糖核苷酸还原酶小亚基M2 Ribonucleotide Reductase M2 31.25 1000 U/L 1
β羟丁酸 Hydroxybutyrate β 6.25 200 umol/l 1
雌三醇 Estriol 25 800 pg/ml 1
雌酮 Estrone 20 640 pg/ml 1
Pentadecylic Acid备注:A15
十五烷酸 1002-84-2
Pentadecanoic Acid分子式:CH3(CH2)13COOH分子量:242.40
Pentadecylic Acid备注:A15
十五烷酸 1002-84-2
地龙探针法PCR鉴定试剂盒Pentadecanoic Acid分子式:CH3(CH2)13COOH分子量:242.40
Pentadecylic Acid备注:A15
十五烷酸 1002-84-2
Pentadecanoic Acid分子式:CH3(CH2)13COOH分子量:242.40
十一酸甲酯 1731-86-8
Pentadecylic Acid备注:A15
Methyl undecanoate分子式:C12H24O2分子量:200.32
Undecanoic acid methyl ester备注:
十一酸甲酯 1731-86-8
Methyl undecanoate分子式:C12H24O2分子量:200.32
Undecanoic acid methyl ester备注:
十一酸甲酯 1731-86-8
技术特点:
1准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果一致性大于99%。
2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速:整个检测流程只需3小时。
4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 是一家生物企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的销售。主营产品:生化试剂、试剂盒、ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白、生化检测试剂盒、分光光度法检测试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒、细胞株、原代细胞、细胞培养基、标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司、赛默飞世尔公司产品。
上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学,暨南大学,南京工业大学,曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒,种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒;另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。
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