原代细胞分离试剂盒II

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原代细胞分离试剂盒II

分离试剂盒编号：ISO-II

分离试剂盒适用：各种人和哺乳动物组织的骨骼肌细胞、平滑肌细胞、心肌细胞、肺组织细胞、软骨细胞及滑膜细胞的分离。

分离试剂盒规格：1

分离试剂盒价格：￥1980

分离试剂盒产地：中国，PriCells

分离试剂盒特征：不含有HIV、HBV、HCV、细菌、支原体、真菌、酵母；不含有内毒素；不含有苯；不含有血清。

生物安全级：1级。

运输条件：4^oC。

储存条件：4^oC，避光。

用途范围：只可用于科研。

原代细胞分离试剂盒II 产品说明书

一、主要适用

骨骼肌细胞、平滑肌细胞、心肌细胞、肺组织细胞、软骨细胞及滑膜细胞。

二、试剂盒组成

1、Buffer A： 100ml × 2 4℃ 保存

2、Buffer B： 50ml × 2 4℃ 保存

3、Buffer C 50ml × 1 4℃ 保存

4、Buffer D： 20ml × 1 4℃ 保存

5、Buffer E： 20ml × 1 4℃ 保存

6、消化液I： 2ml × 2 4℃ 保存

7、消化液II: 2ml × 1 4℃ 保存

三、使用方法

注意：使用前请认真阅读说明书，按说明书的要求对试剂进行妥善保存。

本试剂盒供用于5次组织的原代细胞分离，每次分离的组织约1g。

取消化液I 放入50ml Buffer B中，放4℃保存。用完后，再新鲜配制。消化液II放入50ml Buffer C中，放4℃保存。

1、取组织重约1g，放入无菌培养皿中，取1 × PBS（pH7.4）清洗组织，充分去除组织表面的血渍和其它异物。

2、将组织转入另一无菌的培养皿，切去多余组织如脂肪或坏死组织，用无菌刀将组织切成1mm³小块。

3、用无菌弯头镊将组织块转入50ml的无菌离心管中，让组织块沉淀，吸去多余液体，加入10ml Buffer A，充分混匀，300g离心5分钟，弃上清，如此重复操作3次。

4、用10ml Buffer B重悬组织块，将组织块悬液转移至25cm²无菌培养瓶中，放置CO₂培养箱中，37℃培养24小时。

5用强力吹打使组织分散，将悬液移入15ml无菌离心管，500g离心5分钟，弃上清。

6、取10ml Buffer C 悬浮组织块，置于37℃水浴中30分钟，每10分钟摇动一次，让组织块沉淀。

7、取上清放入50ml离心管中，加入1ml Buffer D, 终止反应。

8、重复步骤6、7两次。

9、将吸出全部上清进行离心，500g离心5分钟，弃上清。

10、取2ml Buffer E悬浮细胞，用血球计数板或电子记数仪计数细胞，并检测细胞活性。

11、悬浮细胞用相应的原代细胞培养基稀释，使每毫升培养基中含有1×10⁶个细胞，接种培养瓶中，大约每平方厘米2×10⁵个细胞。

12、每隔2-4天更换一次培养基（以pH变化为标准），观察细胞生长情况。

售后服务