炭疽杆菌(BA)核酸检测试剂盒

炭疽杆菌(BA)核酸检测试剂盒规格及成分
即用型指标Mix 3.0（1.5 mL）
专一性引物对    （100 μL）
阳性对照        （50 μL）    
超纯水          （1 mL）
说明书：         1 份

运输保存：低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
本试剂盒不但准确、快速、灵敏，还具有以下特点：
1.  即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单。
2.  预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3.  本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
产品名称：炭疽杆菌(BA)核酸检测试剂盒
产品分类：荧光-PCR法
产品编号：BH11703P
产品规格：48T/盒
使用方法    
1 实验所需器材与试剂
1.1 器材
1）PCR仪
2）PCR反应管
3）电泳仪及水平电泳槽
4）高速离心机
5）微量移液器及移液器吸头
1.2 试剂
1）琼脂糖
2）EB（溴化乙锭）
3）去离子水或双蒸水
使用方法
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 stn 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
1.标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2.用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
3.先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
1.在 6 号管中加入 5  μL 10E7 拷贝/μL  的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
2.换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5 拷贝/μL 的阳性对照。
3.换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。
4.NC 管中不加任何阳性对照。
5.从 1-6 号管中分别取 5  μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值， 并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。 
一．PCR 检测（20 μL 体系）
1.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次） 
注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照，其他荧光 PCR 仪器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX。
建议 PCR 反应参数（具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化）
3. 数据采集
按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm， 最大发射光谱在 530 nm。
四、数据处理
以 stn 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
长春花 Catharanthus roseus (L.)G.Don Vinleurosine 长春素 23360-92-1 C46 H56 N4 O9 ≥98%
远志醋Polygclccicccid338-71-20mg
人参皂苷Rh4;参皂甙Rh4 Ginsenoside Rh4 174721-08-5 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
UV法含量测定安磺必利100997-200701常温，避光100mg
补骨脂甲素;补骨脂黄酮 Bavachin 19879-32-4 20mg HPLC≥98%
异荭草苷 无4261-42-1 检测用对照品 异荭草素
木防己Cocculus orbiculatus 樟叶木防己减 7224-61-5 C20H24NO4 ≥96% 碳酸钙中碳、氧同位素标准物质(G04405
对照品盐酸水苏碱110712-200508含量测定
Balbital CIII布他比妥标准品77-26-9200mg布他比妥标准品
云南松Pinus yunnanensis Dixy7nodexy7nodiconiferyl alcohol 二氢去氢二愈创木基醇 28199-69-1 C20H24
长春花Catharanthus roseus Serpentinic acid none 605-14-1 C20H19N2O3 ≥97%
胡椒减PipqrinqHPLC≥99%;20mg/支
地索苷;延龄草苷;延年草甙 Diosgenin glucoside 14144-06-0 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
标准品利福霉素SV0333-200006效价测定
CATECHIN-5-O-GALLATE 儿茶速没食子酸酯度：>95%
LPMAgar
TTC琼脂基础 TTC Agar Base 用于弯曲杆菌的TTC试验(GB标准)
YPD琼脂 Yeast Extract Peptone Dextrose Agar 250克 生物制品和蜜浆制剂酵母菌总数测定
淋病奈瑟菌琼脂培养基250g/瓶用于淋病奈瑟菌的分离与培养，需添加7%脱纤维羊血5070ubationmedia淋病奈瑟菌琼脂培养基250g/瓶用于淋病奈瑟菌的分离与培养，需添加7%脱纤维羊血50701
VancomycinSolution
BF839BacteriumCountSelectiveMedium
SSDC agar(Salmonella-Shigella agar with sodium dexoycholate and calcium chloride) SSDC 琼脂/沙门氏菌-志贺氏菌琼脂(含脱氧胆盐氯化钙) 1.16724.0500 MERCK默克 incubation media SSDC agar(Salmonella-Shigella agar with sodium dexoycholate and calcium chloride) SSDC 琼脂/沙门氏菌-志贺氏菌琼脂(含脱氧胆盐氯化钙) 1.16724.0500 MERCK默克
糖发酵培养基基础 250g 加入各种糖类，供鉴别各种需氧菌对糖类的发酵反应用
沙氏葡萄糖琼脂培养基300ml/袋*药品抑菌剂效力检测中真菌检测
Oxidasereagent
炭疽杆菌(BA)核酸检测试剂盒注意事项   
5.1使用本试剂前请仔细阅读本说明书全文。
5.2 操作时应尽量少说话，因口腔中也含有支原体，可能引起样品污染，而造成假阳性；整个检测过程中，反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行，以避免交叉污染。 5.3 实验时，试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀（混匀时禁止激烈振荡，只需要进行上下倒置多次进行混匀）。
5.4 反应管中加好所有的试剂后，应尽快上PCR仪进行扩增，以免形成过多的二聚体。
5.5细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。如果用户需要进一步提高检测灵敏度，建议细胞在不含青霉素和链霉链等抗生素中进行培养2-3天后送样检测。
 

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