特别提示:包括50×防脱片剂APES在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:50×防脱片剂APES
英文名称:50X Anti-Slice Escaping Agentia APES
产品货号:GS5000
产品规格:10mL|100mL
储存条件:冷藏(2-8℃)避光
概述
APES是一种新型载玻片粘附剂,与一般的粘附剂不同,它是通过对玻璃表面起化学修饰作用,改变其表面的化学物理特性,使组织牢固地贴于玻片上,能有效地防止各种操作过程中脱片现象的发生。用APES处理过的玻片可以广泛用于免疫组织化学、组织学、特殊染色、冰冻切片、细胞培养技术和原位杂交等实验。
特点
应用
适用于需要酶消化、微波、高温高压的防脱片处理
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关注
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名称:Western二抗稀释液
货号:YT070
规格:100ml
本品可以用于Western时二抗的稀释。经本Western二抗稀释液稀释的二抗可以在1-2周内重复使用3-5次。按照每个二抗稀释10毫升计算,一个包装的Western二抗稀释液可以稀释10个或10次二抗。
注意事项:本Western二抗稀释液经过滤除菌处理,使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在一个月内用完,如果发现有沉淀或细菌污染请弃用。
储存条件:4℃,有效期一年。
名称:Western一抗二抗清除剂(中性)
货号:YT073
规格:250ml
本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本Western一抗二抗去除液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约20-30分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。
百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
抗体清除剂选型表:
产品编号 |
YT071 |
YT072 |
YT073 |
YT074 |
产品名称 |
Western一抗二抗清除剂(强碱性) |
Western一抗二抗清除剂(弱碱性) |
Western一抗二抗清除剂(中性) |
Western一抗二抗清除剂(酸性) |
产品包装 |
250ml |
250ml |
250ml |
250ml |
pH |
强碱性 |
弱碱性 |
中性 |
酸性 |
对于膜上蛋白的保留效果 |
好 |
好 |
好 |
好 |
对于一抗二抗的去除效果 |
好 |
好 |
好 |
好 |
去除一抗二抗所需时间 |
15-20分钟 |
20-30分钟 |
20-30分钟 |
40-80分钟 |
适用膜的类型 |
PVDF和NC |
PVDF和NC |
仅PVDF |
PVDF和NC |
腐蚀性 |
强 |
弱 |
无 |
弱 |
用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜,即硝酸纤维素膜时,不宜选用YT071N。从时间角度考虑,强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短,可以优先考虑。从价格因素考虑,强碱性的去除液性价比最高。从安全性考虑,中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作,并进行适当防护,使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
对于特定的抗原和抗体,很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时,可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间,同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液,以摸索出最佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。
注意事项:
1. 使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
2. 本Western一抗二抗去除液仅适用于PVDF膜。用于硝酸纤维素膜时会导致转移到膜上的蛋白有非常显著的损失。
3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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