荧光抗体稀释液(Kolmers法)

特别提示：包括荧光抗体稀释液(Kolmers法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：荧光抗体稀释液(Kolmers法)
产品货号：GL1127
产品规格：50ml|100ml

用途：
荧光抗体稀释，消除荧光抗体非特异性染色，可以用于减缓各种常见荧光抗体的荧光淬灭。Leagene荧光抗体稀释液主要由Kolmers盐溶液、抗荧光衰减剂组成。

储存条件：室温，12个月

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SY0797 蛋白质银染试剂盒 20T|50T
ZN1904 BSA PBS-T(含有0.05%Tween-20)缓冲系统封闭液 500ml
ZN1919 酪蛋白TBS缓冲系统封闭液(干粉) 1包
ZN1933 Western Blotting DAB显色法检测试剂盒(黄色)(兔IgG) 1盒
ZN1940 显影定影试剂盒(固体) 1盒
ZN1957 BSA 5g
ZN1971 Mayor’苏木素 12ml
MT0077 Western Blot膜再生液 100ml
GL0568 溶液(10% PFA) 500ml

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名称：增强型蛋白印迹膜再生液
货号：ZN1922
规格：100ml
产品保存：4℃保存，一年有效
产品说明：增强型蛋白印迹膜再生液能够安全高效地从硝酸纤维素膜和 PVDF 膜上去除一抗和二抗，且不会破坏抗原，从而再次检测化学发光的免疫印迹。与重新跑一个SDS-PAGE 胶比较，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。
产品特点：
1.不需重新制胶电泳
2.节省珍贵样品，在同一张膜上使用相同的样品重新检测
3.高效，去除效果远优于自制缓冲液
4.温和配方，在抗体剥离及重新检测时不会对靶蛋白造成伤害
5.不含硫醇，无刺鼻气味
产品应用：
1.可重复使用硝酸纤维素膜或PVDF 膜，通过不同的一抗检测不同的标靶
2.可重新检测印迹，改正或优化初次实验中无效的抗体浓度
注意事项：
1.刚从冷冻保存中拿出来会出现 SDS的沉淀，建议温水溶解再使用。
2.建议先检测表达量较低的目的蛋白，用再生液处理后检测表达量高的蛋白。
3.本品适用于 NC 膜和 PVDF 膜，推荐使用 PVDF 膜，效果更佳。
4.本产品适用于 HRP 标记的二抗，且用化学发光法检测的印迹膜。
需要材料：
1.化学发光底物
2.用含 0.05%Tween-20的TBS或PBS
3.用于第一次和第二次蛋白质印迹实验的一抗和二抗
4.胶片，化学发光成像仪
使用方法：
注：膜可以 4℃保存在 PBS或TBS 中，直到可以进行剥离程序。
1．将再生液用温水溶解或室温平衡至溶解。
2．用 TBS-T或PBS-T 将膜洗10分钟×3次。
3．将印迹膜放入再生液中，室温孵育20-30分钟。使用足够的体积以确保印迹膜完全润湿(对于8×10cm 印迹需要约 20mL)。
注意：优化孵化时间和温度对于获得最佳结果是必不可少的。对于一些抗体，室温孵育就足够了。
然而，高亲和力抗体可能需要再温育5至10分钟。
4.用 TBS-T或PBS-T将膜洗10分钟×3次。
5.按如下方法检测：
A.完整去除二抗的测试：将膜进行发光检测，如果 5分钟内未检测到信号，则二抗已经成功地从抗原或一抗中去除。
B.完整去除一抗的测试：用 HRP 标记的二抗孵育膜，然后用洗涤缓冲液洗涤。孵育新的一抗和二抗，进行发光检测，如果 5分钟内没有检测到信号，则已经成功地将一抗从抗原中除去。
6.如果在步骤 5 中检测到信号，则返回步骤 2，再剥离 5-15分钟。一些抗原/抗体系统需要更高的温度或更长的孵育时间来完全去除它们。优化剥离时间和温度以确保完全去除抗体，同时防止对抗原的损伤。
7.确定膜被适当剥离后，可以进行第二次免疫印迹实验。
注意：1.印迹可以剥离和重复检测多次，但可能需要更长的曝光时间或更灵敏的化学发光底物。
如果抗原在再生液中变得不稳定，随后的反应可能导致信号降低。
2.剥离后建议重新封闭印记膜。

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