特别提示:包括即用型免疫组化试剂盒(小鼠源IgG型一抗)(AP显色体系)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:即用型免疫组化试剂盒(小鼠源IgG型一抗)(AP显色体系)
英文名称:Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Mouse(AP Chromogenic System)
产品货号:ZN1824
产品规格:80T|160T
本试剂盒采用SABC系统,适于一抗为小鼠来源的抗体。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素对生物素分子有极高的亲和力,是一般抗原抗体亲和力的一百万倍,等电点 pI=6.0~6.5,对组织和细胞的非特异吸附很低。根据研究,SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶可以保证SABC具有很高的敏感性。所以 SABC 兼具高敏感性,低背景和操作简便等优点。百奥莱博采用独特方法生产的SABC不仅有很强的信号放大作用,而且非常稳定。
试剂盒组成:
组分 |
规格 |
5%BSA封闭液 |
6ml/12ml |
生物素标记山羊抗小鼠IgG |
6ml/12ml |
SABC |
6ml/12ml |
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 石蜡切片,常规脱蜡至水。
2. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3. 封闭。滴加5%BSA封闭液,37℃孵育30 分钟。甩干,勿洗。
4. 滴加适当稀释的一抗(小鼠IgG),37℃孵育 1~2 小时或4℃过夜。0.01M TBS(ZN1953)洗5分钟×3次。
5. 滴加生物素标记山羊抗小鼠IgG ,37℃度孵育30分钟。0.01 M TBS洗5分钟×3次。
6. 滴加 SABC—AP,37℃孵育30分钟。0.01M TBS洗5分钟×4 次。水洗1 次。
7. 显色:BCIP/NBT 用 0.01M TBS(pH9.0-9.5)按 1:20 的比例稀释,混匀后加至切片。镜下控制反应时间。蒸馏水洗涤。
8. 核固红轻度复染。水洗,干燥后水溶性封片剂封片(ZN2946)。
建议:
1. 对于 AP(碱性磷酸酶)显色系统,请用不含磷酸根的缓冲液洗涤,如 TBS缓冲液。
2. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
3. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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名称:EDTA-柠檬酸钠抗原修复液(40X)
货号:YT082
规格:125ml
本品是一种常用的抗原修复液,结合了柠檬酸钠和EDTA进行抗原修复的优点,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。
本抗原修复液采用了常用的柠檬酸钠缓冲液和EDTA,结合了两者修复抗原的优点,并经过适当优化,可以更加有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
本产品适用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片等其它样品。
一个包装的本产品可以配制成5000毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算,一个包装的本产品可以用于500个样品。
注意事项:
1. 抗原修复过程可以使用百奥莱博的染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受沸水浴,而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。
2. 本抗原修复液使用前必须用重蒸水或Milli-Q水稀释40倍,配制成抗原修复液(1X)。
3. 冻存的本产品需适当加热后才能完全溶解。同时由于本产品含有少量的特殊去垢剂,加热后会产生非常细密的气泡而呈现非常均匀的类似浑浊状,属于正常现象,并非不溶解或产生了沉淀。室温放置较长时间后,例如1-2天,溶液会完全澄清。对于溶解后呈现非常均匀的类似浑浊状的本产品,此时即可取适量稀释后使用。抗原修复过程中加热时也会产生非常细密的气泡而呈现均匀的浑浊状,也属于正常现象,请放心使用。
储存条件:4℃,有效期一年。
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