特别提示:包括中压玻璃层析柱(φ15mm×75cm)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:中压玻璃层析柱(φ15mm×75cm)
产品货号:QN3318
产品规格:15mm*75cm
本公司设计的系列层析色谱柱,适用于分子筛,离子交换,凝胶渗透与亲和层析。设计先进,装柱简便,洗脱"死体积"小,具有良好的耐化学腐蚀性,是生物化学、石油化工、化学分析、疾病诊断等实验室及化学制药的中试及大规模生产必备的最佳层析工具。柱内压可增加(5~7巴)。
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亲和层析柱是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的层析技术。如抗原和抗体,蛋白质A与一些抗体,重组蛋白质和一些金属离子之间,均具有专一的亲和力,在一定条件下能紧密结合成复合物,而这种结合又是可逆的,改变条件可相互解离。当把可结合的一对分子的一方(称配体)结合在惰性载体上使其固相化,另一方随流动相流经该载体,双方即结合为一整体。然后设法将它们解离,从而得到与配体有特异结合能力的某一特定的物质。
我公司提供的亲和层析柱空柱是专门为实验室小批量纯化抗体、重组蛋白或其它分子而设计,方便进一步进行科学研究。
亲和层析柱空柱所用的柱子为聚丙烯塑料,这种工程材料通过大量的应用证明具有清洁无毒,不与生物分子结合和低溶解度的优点。
亲和层析柱空柱所用的筛板是选用纯净的UHWMPE为原料,经独特的工艺加工而成,具有亲水性。筛板在装填时安置在填料基质的上下端,以阻挡昂贵的基质渗出。
亲水性筛板采用了领先的亲水性UHWMPE生产技术,该筛板能保证使用重力法时的流速为1~2mL/分钟或1~2滴/秒。同时,该筛板和其它供应商相比,不会由于亲水性基团的引入而对蛋白质产生吸附。另外,该亲水性筛板在使用过程中不易形成气泡,气泡会使流速降低,液体通过基质不均匀。
亲和层析柱常用于抗体纯化
金黄色葡萄球菌蛋白A(Protein A,SPA)能与人及多种哺乳动物血清IgG分子中的Fc片段结合,结合的亲和性次序依次是猪、狗、兔、人、猴、鼠、小鼠及牛。SPA除与IgG结合外,还能与血清中少量的IgM和IgA结合,SPA菌对各类免疫球蛋白的吸附率:IgG为90%~98%,IgM为2%~30%,IgA为1.5%~20%。纯化抗体一般用Protein A作为纯化的配体,也可以用Protein G,Protein L或异源性抗体作为配体。
近年来,随着生物技术,特别是基因工程技术的迅猛发展,重组蛋白表达和纯化越来越容易。常用的重组蛋白表达策略是把蛋白与亲和标签融合表达,利用亲和标签一步纯化出目标蛋白。此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性,就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合,从而得以纯化任何蛋白质。此方法与常规的层析方法不同之处在于,无需针对不同的蛋白质开发特定的配体和方法。采用保护蛋白质结构和功能完整性的温和条件,可一步亲和层析从粗提物中纯化出重组蛋白,纯度可达90%以上。
亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。亲和标签系统一般具有以下特征:
(a)一步的吸附纯化;
(b)对三级结构和生物活性影响小;
(c)可方便且专一的去除以产生天然蛋白质;
(d)在纯化过程中重组蛋白的分析简便准确;
(e)适用于大量的不同蛋白质。但是没有哪个标签是完美的,只能根据实际需要去自己筛选,下表是部分的标签以及纯化的方案。
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