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产品名称:毕赤酵母X33菌种
英文名称:Pichia pastoris Strain X33
产品货号:BTN12-213y
产品规格:1 mL
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名称:大肠杆菌BL21(AI)菌种
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规格:1 mL
BL21(AI)来源于BL21菌株,是大肠杆菌B/r型菌株(E.coli B/r),在araBAD操纵子的araB位点含有T7 RNA聚合酶基因,T7 RNA聚合酶基因的表达可以通过阿拉伯糖或者葡萄糖来调节,使用L-阿拉伯糖诱导araBAD启动子下游的蛋白表达。使用葡萄糖可以抑制araBAD启动子下游的蛋白表达。但菌株不含有lon蛋白酶。
BL21(AI)是膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株,该酶的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。
BL21-AI感受态适用于任何以T7启动子为基础的表达载体,能够进行高水平的重组蛋白表达。BL21-AI感受态细胞能够有效表达对其他BL21细胞有毒或生长抑制的蛋白。
菌种名称:BL21(AI)
类别:大肠杆菌
培养基:LB培养基
生长条件:37℃,有氧
质粒转化条件:42℃热激
保存条件:-80℃
名称:大肠杆菌BL21(DE3)菌种
货号:BTN12-25y
规格:1 mL
该菌株来源于B系大肠杆菌而不是K-12,但有数个基因从E.coli K-12转导而来,它是广泛使用的蛋白表达用宿主菌。
产品特点:
1.染色体上携带由lacUV5启动子控制的T7 RNA聚合酶基因,故在IPTG诱导下,可以高效表达T7启动子驱动的外源基因。
2.缺失lon和ompT两个蛋白酶基因,有利于外源蛋白的纯化。
3.由于有背景表达,故该菌株适合用于非毒性蛋白的表达,不适用于毒性蛋白的表达。
4.本菌种不带任何抗菌素抗性。
基因型:
大肠杆菌BL21(DE3)菌种的基因型是:B系,F-,lon-11,Δ(ompT-nfrA)885,Δ(galM-ybhJ)884,?DE3[lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5],Δ46,[mal+]K-12(λS),hsdS10(各文献上报道的基因型稍微有所不同,此处采用美国耶鲁大学Coli Genetic Stock Center的资料)。
大肠杆菌BL21(DE3)基因型符号及其含义列表如下:
基因型符号 |
含义 |
B系 |
B系大肠杆菌默认基因型是lon-dcm-,lon突变是lon启动子有一个IS186插入突变,使ATP依赖性蛋白酶Lon缺失,提高重组蛋白产量;dcm突变使胞嘧啶甲基化酶失活,CCWGG中的第二个C不再被甲基化,可通过影响甲基化依赖的突变修复系统而提高突变率 |
F- |
不携带F质粒 |
lon-11 |
描述见上 |
λ(DE3[lacI lacUV5-T7 gene1 ind1 sam7 nin5]) |
染色体携带DE3 λ原噬菌体,此片段又携带lacI、sam7I等基因和由lacUV5启动子控制的T7 RNA聚合酶基因 |
Δ(ompT-nfrA)885 |
缺失从DLP12原噬菌体到Rhs因子这段区域,包括appY、ompT、envY、ybcH和nfrA五个基因。其中ompT编码外膜蛋白酶VII,其缺失降低了蛋白降解,有利于表达蛋白纯化 |
Δ(galM-ybhJ)884 |
缺失galMKTE、modFE、acrZ、modABC、ybhA、pgl、ybhD、ybhH、ybhI和ybhJ基因 |
hsdS10 |
EcoB系统Eco位点识别能力缺失,导致甲基化修饰和限制功能均失 |
Δ46 |
一个恢复活性的原噬菌体,在K-12中无活性 |
[mal+]K-12(λS) |
malK、lamB、malM来于E.coli K-12,为野生型,通过转导获得。野生型的lamB使得菌株对?噬菌体感染敏感 |
保存条件:-80℃保种保存,有效期一年。
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