特别提示:包括大肠杆菌Tuner(DE3)菌种在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:大肠杆菌Tuner(DE3)菌种
英文名称:E.coli Tuner(DE3) Strain
产品货号:BTN12-56
产品规格:0.5mL
大肠杆菌Tuner菌种是在BL21基础上开发的、专门用于精确控制IPTG诱导表达的菌种。
产品特点:
1.携带DE3溶源性?噬菌体,其上的lacUV5启动子可以驱动T7 RNA聚合酶基因表达。
2.乳糖转运酶缺失,使得启动子lacUV5的活性可以通过IPTG浓度进行精准调节,最低可诱导浓度可以低到10μMIPTG。
3.编码Lon和OmpT两个蛋白水解酶均缺失,有利于提高表达蛋白的质量。
4.EcoB甲基化修饰和限制系统缺失,EcoB位点已甲基化和未甲基化的质粒均可用于转化,使得来于多种宿主菌的质粒均可用于转化。
5.该菌株适用于pET系列载体及其他任何以T7启动子驱动的表达载体。
大肠杆菌Tuner(DE3)菌种的基因型:
B系,F
-,(DE3),ompT,hsdS
B(r
B-m
B-),gal,dcm,lacY1
大肠杆菌HB101菌种基因型符号及其含义列表如下:
基因型 |
表现型 |
B |
B系大肠杆菌默认基因型是lon-dcm-,lon突变是lon启动子有一IS186插入突变,使ATP依赖性蛋白酶Lon缺失,提高重组蛋白产量;dcm突变使胞嘧啶甲基化酶失活,CCWGG中的第二个C不再被甲基化 |
F- |
不携带F质粒 |
DE3 |
携带DE3 λ溶原型噬菌体,此噬菌体又携带lacUV5启动子-T7 RNA聚合酶基因,在IPTG诱导下可以表达T7 RNA聚合酶 |
ompT |
膜外蛋白酶VII缺失,有利于蛋白纯化 |
hsdSB |
EcoB位点的甲基化修饰和限制系统缺失,表现型为rB-mB- |
gal |
不能代谢半乳糖 |
lacY1 |
乳糖转运酶缺失 |
保存条件:-80℃,有效期一年
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大肠杆菌ET12567(pUZ8002)主要用来进行链霉菌基因操作,是链霉菌基因敲除或者基因倍增通用的菌株。
产品特点:
1.携带pUZ8002质粒,此质粒的tra基因编码转移蛋白Tra,使得质粒DNA能从大肠杆菌转移到链霉菌。
2.是甲基化缺陷型,故其转移的质粒DNA不会被大部分有甲基修饰系统的链霉菌降解。如果链霉菌受体菌不含甲基化修饰系统,则也可以使用DH5a(pUZ8002)菌作为供体菌。
3.培养时需要加入25 μg/mL氯霉素和25 μg/mL卡那霉素以维持细胞内pUZ8002伴侣质粒的存在。
4.跟ET12567(pUZ8002)兼容的质粒是pSET152 和pKC1139。
的基因型和表现型:
基因型 |
表现型 |
F- |
不携带F质粒 |
ara-14 |
阿拉伯糖异构酶失活,不能利用阿拉伯糖 |
dam-13::Tn9 |
含转座子Tn9 |
dcm-6 |
Dcm修饰限制系统的胞嘧啶甲基化酶失活,不能甲基化CCWGG的第二个C |
galK2 |
半乳糖激酶失活,不能利用半乳糖,2脱氧半乳糖抗性 |
galT22 |
半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶失活,不能利用半乳糖,2脱氧半乳糖抗性 |
glnV44 |
同supE,使琥珀终止子编码谷氨酰胺 |
hisG4 |
不能合成组氨酸 |
hsdM |
EcoK修饰限制系统的腺嘌呤甲基化酶失活 |
hsdR |
EcoK修饰限制系统的限制性内切酶失活 |
lacY1 |
半乳糖苷通透酶突变,不能利用乳糖 |
leuB6 |
β-异丙基苹果酸脱氢酶失活,不能合成亮氨酸 |
mtl-1 |
不能利用甘露醇 |
recF143 |
recF重组途径缺失,降低质粒间的重组 |
rpsL136 |
30S核糖体S12突变,导致对链霉素抗性 |
thi-1 |
不能合成硫氨(维生素B1) |
tonA31 |
外膜蛋白突变,抗T1、T5、φ80噬菌体感染 |
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xyl-5 |
不能利用木糖 |
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Zjj-202含Tn10插入,有四环素抗性 |
保存条件:-80℃,有效期一年
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