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Human Kidney PrimacellTM:Normal Renal Mesangial Cells |
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人肾系膜细胞培养试剂盒价格【Human Kidney PrimacellTM:Normal Renal Mesangial Cells】
人肾系膜细胞属于血管周细胞,位于肾小球毛细血管袢之间。其中,系膜细胞有多种生理功能包括和分泌系膜基质,胞吞和加工血浆大分子,通过系膜细胞收缩和分泌血管活性激素控制肾小球血流动力学。肾系膜细胞增生和基质的过多产生是多种肾小球肾炎的主要病理表现,如IgA肾病,狼疮性肾炎,糖尿病肾病以及在肾小球硬化过程中细胞外基质增加。在培养中细胞增殖和基质合成/降解是通过细胞因子和生长因子调控的,因此细胞培养是研究系膜扩张、瘢痕形成和肾小球硬化的理想方法。 虽然肾系膜组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的肾系膜组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的薄的肾系膜组织片能使得肾系膜组织中肾系膜细胞的一些功能特性发生改变,从而将肾系膜细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的肾系膜细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以最大程度地降低所培养的人原代肾系膜细胞中成纤维细胞的含量。 人肾系膜细胞细胞培养试剂盒适合于培养人的肾系膜细胞组织细胞。本试剂盒包含: (1)OptiTDSTM人肾系膜细胞组织解离液(3×1ml) (2)人肾系膜细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM人肾系膜细胞成纤维抑制剂(1ml(500X)) (4)人肾系膜组织洗液(5 x 100 ml) (5)人肾系膜细胞生长因子(1ml500X)及血清(5x10ml) (6)人肾系膜细胞基础培养基(5 x 100ml) (7)人肾系膜组织预备液 (1 x 100 ml) (8)人肾系膜细胞培养试剂盒使用说明书
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1人肾系膜细胞培养试剂盒价格.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低 1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
CM-R010大鼠肺大动脉平滑肌细胞完全培养基100mL坎地沙坦酯(标准品)Candesartan cilexetil质量规格:HPLC>98%,标准品
AGS细胞,人胃腺癌细胞 人少突胶质前体细胞,HOPC-os细胞 恒河猴皮肤细胞;RM-S1卡奈替尼Canertinib质量规格:>98%,BR
Daudi(人淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2GEMSA2-Guanidinoethylmercaptosuccinic Acid 质量规格:进口原装Santa,99%
CA14 Others Mouse 小鼠 CA14 / Car14 人细胞裂解液 (阳性对照) 枸橼酸喷托维林/托可拉斯/妥克拉司Carbetapentane citrate/Pentoxyverine citrate质量规格:含量98.0%~100.5%
人神经母细胞瘤细胞;SH-SY5Y卡洛芬Carprofen质量规格:>99%
CL-0107HGC-27(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×2氯霉素(标准品)质量规格:>99%,标准品Chloramphenicol
小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swiss albino 大鼠角膜上皮细胞完全培养基 100mL氯霉素(植物细胞培养级)质量规格:>99%,用于植物细胞培养Chloramphenicol
K562/Adr 人白血病阿霉素耐药株酮舍林1酸盐(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Ketanserin Tartrate
IL10 Others Human 人 IL10 / Ierleukin-10 人细胞裂解液 (阳性对照) 酮康唑质量规格:>99%,BRKetoconazole
豹猫肺成纤维样细胞;LCL2酮康唑(标准品)质量规格:HPLC>99%,标准品Ketoconazole
EC109,人食管癌细胞 卵巢癌顺铂耐药株,SKOV-3/DDP细胞 SW1353(骨肉瘤细胞)五味子酯甲(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Schisantherin A
人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H2087西贝母碱(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Sipeimine
CXCL16 Others Mouse 小鼠 CXCL16 / SRPSOX 人细胞裂解液 (阳性对照) 西红花苷,α-藏花素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Crocin
猪胚胎传代细胞;ST西红花苷I(标准品)质量规格:HPLC≥97%,标准品Crocin I
人肾系膜细胞培养试剂盒价格SELPLG Others Mouse 小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人细胞裂解液 (阳性对照) 吴茱萸碱质量规格:≥98%(T),BREvodiamine
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)人肾系膜细胞培养试剂盒价格复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。