Endo-β-N-acetylglucosaminidase(Endo-S2)是一种内切N-乙酰葡萄糖胺酶,它是来自化脓性链球菌(streptococcus pyogenes),能够切除糖蛋白N-连接糖链最内侧两个N-乙酰葡萄糖胺之间的糖苷键。对高甘露糖型、杂合型和双天线复杂型都有效果。
酶学性质:
来源:微生物
分类:EC 3.2.1.96
分子量:90 kDa (SDS-PAGE)
最适pH:8.0
最适温度:37°C
底物选择性:能够切割高甘露糖型、杂合型和双天线复杂型糖链。
糖蛋白水解位点:糖蛋白N-连接糖链最内侧两个N-乙酰葡萄糖胺之间的糖苷键。
储存温度:-20°c
失活条件:反应混合物在85°℃孵育10min即可失活。
酶活定义:
单位酶活定义为在下述条件下,10 ul的反应体系中,37C反应1小时从5ug人源lgG中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。
应用:
用于从糖蛋白切除N-糖链最内测两个N-乙酰葡萄糖胺之间的糖苷键。
技术指标:
外观:无色液体(含甘油或不含甘油)
蛋白纯度:≥95%(SDS-PAGE)
比活性:≥5000 u/mL
实验示例:
1.用去离子水溶解1-20 ug的糖蛋白,加入1 ul的10×GlycoBuffer 1,用去离子水定容到10 ul;2.加入1-2 ul的Endo s2,轻轻吹打混匀
3.37°℃孵育60 min;
4.用于SDS-PAGE分析或HPLC分析。
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