M-MuLV反转录酶(M-MuLV Reverse Transcriptase)是一种RNA依赖性DNA聚合酶,可实现RNA模板的逆转录。M-MuLV反转录酶来源于小鼠白血病病毒(Murine leukemia virus,MuLV)。M-MuLV反转录酶是一个多聚体蛋白,包含560个氨基酸,是MuLV基因组的一部分。它具有DNA聚合酶活性和RNase H活性,可分离得到不具RNase H活性的反转录酶变体M-MLV RT。
M-MuLV反转录酶可使用RNA作为模板,合成第一链cDNA。M-MuLV反转录酶是一种高效和高保真的RNA逆转录酶。它广泛用于原核生物mRNA的逆转录和病毒RNA的检测,在cDNA合成与各种RNA检测技术中发挥关键作用。M-MuLV反转录酶是实现RNA等温扩增的关键酶,它可以直接识别RNA模板,高效转录为cDNA,为后续DNA扩增提供模板。使用M-MuLV反转录酶,RPA技术可以实现RNA病毒的快速、高效和高保真扩增,在分子诊断中具有重要应用价值。
M-MuLV反转录酶由E.coli表达的重组蛋白,是将蛋白基因接入稳定表达载体,经克隆筛选,质量验证,挑选的稳定表达株,由化学成分确定的培养基(不含有任何动物源成分)发酵制备,工艺稳定,保证了产品质量及批次间的一致性。
联系电话:18018625233 QQ:2303607288
规格参数:
货号:EH02501
规格:2000U/10000U
为工业客户提供n*10000U。
质量控制:
纯 度: 经高效液相色谱(SEC-HPLC)和SDS-PAGE检测,纯度大于95%.
使用说明:
长期储存于-80℃,首次使用后保存于-20℃,避免反复冻融。
产品特点:
1. M-MuLV反转录酶(M-MuLV Reverse Transcriptase)同时具有DNA聚合酶活性和RNA酶H活性:
DNA聚合酶活性:可以使用RNA模板合成DNA,实现RNA的逆转录;
RNA酶H活性:可以切割RNA-DNA杂合体中的RNA链,释放RNA模板并使第一链cDNA成熟。
2. 高效:
M-MuLV反转录酶具有较高的逆转录效率,可在短时间内合成较高产量的cDNA。在优化条件下,其cDNA产量可达2-3μg/μL反转录体系。
3. 高忠诚度:
M-MuLV反转录酶可高保真的合成cDNA,其错配率低于10^-5,这有利于后续的基因克隆与检测。
4. 添加剂耐受性:
M-MuLV反转录酶对常用的反转录添加剂如DTT、rNTP、cDNA合成引物等都有较好的耐受性,易于优化反转录体系。
M-MuLV反转录酶(M-MuLV Reverse Transcriptase)主要应用:
1. cDNA文库构建
M-MuLV反转录酶可实现mRNA的高效逆转录,合成第一链cDNA。这是cDNA文库构建的第一步,对基因克隆与功能研究至关重要。
2. RT-PCR
将M-MuLV反转录酶用于RNA的逆转录,得到的cDNA可作为PCR的模板,实现RNA的检测与扩增。这种联合使用大大扩展了PCR的应用范围。
3. Northern blot
将M-MuLV反转录酶合成的放射性或非放射性标记的cDNA用于Northern blot,可以实现特定RNA的检测。
4. cDNA探针
使用M-MuLV反转录酶合成的cDNA可作为各种核酸杂交技术的探针,实现靶核酸的检测。
5. virus检测
设计特异引物,使用M-MuLV反转录酶可首先将病毒RNA逆转录为cDNA,然后采用PCR等技术实现病毒的检测,应用于临床诊断。
6. miRNA检测
miRNA的逆转录依赖M-MuLV反转录酶,得到的cDNA可作为PCR和基因芯片的模板,实现miRNA表达谱的分析。
7. RNA编辑
M-MuLV反转录酶可用于RNA的逆转录,得到的cDNA可进行突变引入等操作,实现RNA功能区的编辑。
8. RNA位点定向诱变
在cDNA合成引物上引入 intended 突变位点,使用M-MuLV反转录酶转录后获得突变体cDNA和相应的RNA。
9. 杂交簇技术
使用M-MuLV反转录酶合成的cDNA探针与靶核酸杂交,实现靶核酸的富集、分离、检测等,这是一种重要的核酸分离技术。
M-MuLV反转录酶(M-MuLV Reverse Transcriptase)在RPA技术中应用:
1. RNA模板扩增
M-MuLV反转录酶可以直接识别RNA模板,合成对应的DNA链,实现RNA的等温扩增。这使RPA技术可以直接用于检测RNA病毒如新型冠状病毒、H1N1等,扩大了RPA的应用范围。
2. 两步反应:
RPA可以采用两步反应进行RNA扩增,即:
第一步:使用M-MuLV反转录酶将RNA模板反转录为cDNA;
第二步:使用常规DNA聚合酶对cDNA进行等温扩增。
这种两步法可以避免RNA在RPA反应中的降解,取得更高质量的扩增产物。
3. 高效转录
M-MuLV反转录酶具有较高的转录效率,可以快速转换RNA为cDNA,为后续的DNA扩增提供充足的模板,实现高效的RNA扩增。
4. 热稳定性好
M-MuLV反转录酶具有较好的热稳定性,可以适应RPA反应的温度要求(25-45°C),发挥较高活性,实现RNA的等温扩增。
5. 高保真
M-MuLV反转录酶具有较高的复制保真度,可以准确转录RNA序列为cDNA,为高保真的RNA扩增奠定基础。
联系电话:18018625233 QQ:2303607288
相关RPA原料:
EH03201 Bst DNA聚合酶 Bst DNA polymerase
EH04801 核酸外切酶 IV Exonuclease IV
EH04701 核酸外切酶 III Exonuclease III
EH02501 M-MuLV反转录酶 M-MuLV Reverse Transcriptase
EH03301 Bsu DNA聚合酶大片段 Bsu DNA polymerase, Large Fragment
EH04501 重组肌酸激酶(CK) Creatine Kinase
EH03501 T4 UvsX重组酶 T4 UvsX Recombinase
EH03401 T4噬菌体基因32编码蛋白(gp 32) T4 gene 32 Protein