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订购信息：
| 产品名称 | 产品状态 | 规格 |
| 试纸条型RT-RAA核酸扩增试剂（冻干颗粒） | 白色，球形颗粒 | 8T |
| 试纸条型RT-RAA核酸扩增试剂（冻干颗粒） | 白色，球形颗粒 | 48T |
检测原理：
试纸条型RT-RAA冻干颗粒是基于重组酶介导链置换核酸扩增（Recombinase-aid Amplification，RAA）技术开发的恒温核酸扩增检测试剂，在39～42℃恒温条件下特异识别并扩增目标样本的核酸片段，可配合通用型核酸检测试纸条进行检测判断。
产品用途：
RT-RAA冻干颗粒可应用于核酸RNA的快速扩增。
储存及有效期：
本产品存储于2~28℃、干燥、避光条件下，有效期为12 个月。
引物设计：
RAA核酸扩增技术对引物设计的要求与常规PCR引物设计有一定的区别。由两条寡核苷酸组成一对引物，分别特异性识别一个核酸目标物的上下游核苷酸序列；引物长度在28-35 nt之间，序列中无回文序列、连续单碱基重复序列和内部二级结构区；引物Tm值不作为设计时主要考虑因素。建议在开展RAA（基础型）扩增反应之前，先进行引物的筛选试验，以便得到较高的检测灵敏度。
探针设计建议方法：探针长度在46-52 nt之间，序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基；探针的5’端用一种抗原标记物标记，通常为FAM基团或羧基荧光素；内部含有碱基核苷酸类似物替换核苷酸（例如四氢呋喃残基THF-有时称为'dSpacer'）；3’末端有聚合酶延伸阻断基团（例如C3-spacer，磷酸基或双脱氧核苷酸）。如下图所示：
注意：在开始实验前检查探针5’端标记的基团与下游引物5’端标记的基团是否与所用的试纸条相匹配；建议在开展 RAA试纸条型扩增反应之前，先进行引物的筛选试验，以便得到较高的检测灵敏度。
产品说明：
1. 本产品是“Ready to Use”即用型RT-RAA 冻干颗粒；含有除引物和探针外所有的反应要素，如重组酶、DNA 聚合酶、逆转录酶、dNTP 、ATP和PEG 35000等。
2. 试剂盒最低检测下限为 10-100copies/测试（依据引物筛选优化程度和检测手段）。
3. RT-RAA扩增RAA。
4. 试纸条型试剂：含有外切酶适用于荧光法和试纸条法分析扩增产物。
适用仪器：
恒温金属浴、恒温水浴锅。
检测步骤：
1. 核酸样本提取：请参考传统RNA提取方法或其他同效商品化试剂盒提取RNA样本。
2. 样本检测
2.1 反应体系： 单管反应体系（25μL）：
2.2 操作步骤
2.2.1 根据反应数量，按照反应体系配制含有水、上游引物(10 μM)、下游引物(10 μM)的 Mix，混合均匀后加入装有核酸扩增试剂的检测单元管中；
2.2.2 向检测单元管中加入经步骤1处理得到的待测RNA样本；
2.2.3 再向检测单元管盖上加入1.5~2.5 μL 的Mg2+，盖上管盖，上下颠倒 轻甩充分混匀5-6次，低速离心10 sec； （注：本步骤“是否充分混匀”将决定实验结果的重复性）
2.2.4 将检测单元管放入37~40℃ 恒温金属浴（或恒温水浴锅）中，孵育30min。荧光法则每隔30秒，采集一次荧光信号。
2.2.5 试纸条检测：反应结束后，将25μL反应体系液用无菌水或者PBS稀释（25μL反应体系液:150μL稀释剂），利用通用型核酸检测试纸条进行检测。
结果分析与判定：
可以根据试纸条判定实验结果。
注意事项：
1. 试剂条检测，推荐使用免开盖的装置进行试纸条检测，避免气溶胶污染。
2. 开始检测前请仔细阅读本说明书全文，并严格按照要求进行操作。
3.不同类型样品所提取的核酸含量和纯度有差异，可能导致扩增效率不同。
4.当实验室环境、试剂、仪器或配件存在阳性物质（例如质粒、扩增产物等）污染，或样本间存在交叉污染的情况时，会影响检测结果准确性，出现假阳性结果。
5. 务必保证试剂保存、配制或运输得当，否则可能导致试剂检测性能下降，出现假阴性结果。
6. 阳性对照为质粒，适用于评价本试剂核酸扩增性能。
7. 请严格按照基因扩增实验室的管理规范进行操作。 实验结束后，检测过程中所产生的废弃物应按照相关规范进行处理。
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