铁离子还原能力测试试剂盒惠诚生物现货

铁离子还原能力测试试剂盒
（A003-96T 分光光度计法）
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一、 测定原理
还原力测定是以普鲁士蓝Fe₄（Fe（CN）₆）生成量为指标，抗氧化剂能将铁氰化钾还原，再利用亚铁离子生成普鲁士蓝，该物质在700nm处有最大吸收峰。吸光值越大，表明样品还原力越强。
二、 试剂组成
试剂一：液体100mL×1瓶；
试剂二：液体100mL×1瓶；
试剂三：液体100mL×1瓶；
试剂四：液体1mL×1瓶；
试剂五：1mg/mL维生素C标准品，1mL。
三、 储存条件及有效期
试剂盒4℃可保存6个月。
四、 试剂的配制
试剂二工作液：将试剂一与试剂二等量混合，摇匀，注意避光；
试剂四工作液：用60mL双蒸水溶解，摇匀后，现配现用，注意避光，配好的试剂请于2小时内用完。
试剂五：1mg/mL维生素C标准品，100μL，-20℃保存。
五、 操作步骤

	空白孔	测定孔1
试剂二工作液（mL）	2	2
样品（mL）		0.4
样品稀释液（mL）	0.4

充分混匀，50℃水浴20min

试剂三工作液（mL）

1

1

充分混匀，3000转/分离心10分钟²_­，取3mL上清液加入新试管中

试剂四工作液（mL）

0.6

0.6

充分混匀，10分钟内于700nm处采用分光光度计测定吸光值。
¹如样品颜色很深可做对照管，做法是不加试剂四工作液；
²如确定样品无蛋白成分或蛋白含量很低，可不进行离心。
 
六、计算公式
一般直接采用700nm处吸光值表示，吸光值越高，表明样品还原力越强。
七、注意事项
1. 如样品中色素物质不是分析对象，建议先通过SEP C18柱进行脱色处理，处理后样品可不做对照孔；
2. 试剂有一定腐蚀性，请带手套操作；
3. 加入试剂四以后请充分混匀，并尽快测定，长时间放置会有沉淀产生；
4. 在低浓度下样品浓度和吸光值呈线性关系，当吸光值高于1.0时加入试剂四后容易产生絮状沉淀，因此建议摸索和调整好样品浓度。

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