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ELISA操作试剂准备过程及问题解答
- 试剂盒和样本不平衡，直接打开后进行检测
- 浓缩试剂如洗涤液等未进行稀释，直接使用；
- 冻干试剂溶解不充分，解冻样本使用前不混匀；
- 标准品稀释不当，酶标试剂配制时间不当
解决办法：
1) 试剂盒使用前应整体取出，在室温下平衡30min后再进行测定；
2) 根据产品标签或说明书要求，对浓缩试剂采用适当的溶剂稀释，并按要求保存或使用；
3) 冻干试剂溶解后，要放置15min左右，使用前再次混匀；冻存样本溶解后，可轻轻振荡混匀，如有颗粒或沉淀，需离心后取上清备用。
4) 标准品如需稀释，按照说明书要求进行，稀释量至少多于加样量的20%。部分酶标试剂要求加样前现配现用，应按照要求配制，避免提前配制导致酶的失活。
英文名称：West Nile DetectTM IgM Capture ELISA
公司品牌：美国Inbios
产品货号：WNMS-1
产品规格：96T
检测样本：血清
储存条件：2-8℃
检测方法：ELISA
预期用途：仅用于科研，体外检测使用
参考价格：询价
供应商家：深圳市科润达生物工程有限公司
西尼罗河病毒IgM检测试剂盒产品规格
96T
西尼罗河病毒IgM检测试剂盒预期用途
西尼罗河病毒IgM检测试剂盒可用于定性检测人血清中的西尼罗病毒IgM抗体。本实验用于临床实验室诊断临床上有与脑膜脑炎症状相一致的病人西尼罗病毒的感染。阳性的结果必需用蚀斑减少中和试验（PRNT）来证实，或者使用现有的CDC的的指南来确诊该疾病。
警告：一些西尼罗病毒IgM实验的测试样品中可能含有肠道病毒的抗体，应注意其交叉反应。
西尼罗河病毒简介
感染西尼罗病毒可引起包括脑炎在内的一系列临床症状，西尼罗病毒（WNV）是一种潜在的嗜神经病毒，它可引起人群中无症状的感染或者是发热。人或动物的感染最初在西半球并无证实，直到1999年在纽约首府爆发了该疾病，自此以后，该疾病扩散至美国的其他地方，到2003年，该疾病在46个国家发生，并且引起超过9800人发病。
大多数西尼罗感染者无任何症状，小部份人可能发展为包括发热﹑头痛﹑身体疼痛﹑皮肤发疹﹑淋巴结肿大在内的轻微的临床症状，在临床上，人西尼罗病毒感染引起的发热是具有自限性的急性发热性疾病，伴头痛﹑肌肉酸痛﹑多发性关节痛﹑发疹﹑胃肠道症状和淋巴结炎。少于1％的感染者发展成严重的疾病，包括脑炎和脑膜炎。
西尼罗河病毒IgM检测试剂盒使用了西尼罗的重组抗原（WNRA），它可以作为西尼罗病毒感染的快速血清学敏感指标。西尼罗重组抗原是由包含两个西尼罗抗原（由prM-E遗传因子编码）的一段序列构成。
西尼罗河病毒IgM检测试剂盒检测原理
西尼罗河病毒IgM检测试剂盒是基于双夹心法原理。未知的样本与质控品加入到微孔（包被有抗人IgM）中进行温育，样本中的特异性抗体会结合到微孔板上。洗板之后分别加入西尼罗河病毒抗原（WNRA）和普通细胞抗原（NCA）进行反应。再次洗板后加入酶联物，用于检测所结合的抗原。第三次洗板后加入底物液，一段时间后加入终止液终止颜色反应，溶液变为黄色。450nm下测量OD值。结果中WNRA与NCA的比值ISR可用于结果的判定。
西尼罗河病毒IgM检测试剂盒组成成分
●微孔板 12×8 包被有羊抗人IgM
●样本稀释液 1×25ml 即用型、–70℃环境下可稳定至效期结束
●阳性质控 1×50ul –70℃环境下可稳定至效期结束
●阴性质控 1×50ul –70℃环境下可稳定至效期结束
●西尼罗河病毒抗原（WNRA） 1×3ml 即用型、–70℃环境下可稳定至效期结束
●普通细胞抗原（NCA） 1×3ml 即用型、–70℃环境下可稳定至效期结束
●酶联物 1×6ml 即用型、2~8℃环境下可稳定至效期结束
●洗涤液 1×120ml 10倍浓缩
●EnWash 1×20ml 即用型、2~8℃环境下可稳定至效期结束
●底物液 1×9ml 即用型、2~8℃环境下可稳定至效期结束、避光保存
●终止液 1×6ml 即用型、2~8℃环境下可稳定至效期结束
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