(1)基本原理
细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3''-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3''-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3''-OH形成,很少能够被染色。TUNEL实际上是分子生物学与形态学相结合的研究方法,对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征,可用于石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、培养的细胞和从组织中分离细胞的细胞形态测定,并可检测出极少量的凋亡细胞,在细胞凋亡的研究中被广泛采用。
(2)实验方法
在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3''-末端。在适合底物存在下可以产生很强的颜色反应,特异准确地定位出正在凋亡的细胞。根据标记物的不同,分析仪器可以用普通的光学显微镜,也可以用荧光显微镜或流式细胞仪。
bio-equip.com
2015年12月22日,江苏凯基生物技术股份有限公司通过全国中小企业股份转让系统挂牌审批
成功于新三板挂牌
股票代码:835272。
凯基生物成立于2000年,是一家专业从事生物试剂研发、生产、销售和生物技术服务的高新技术企业,致力于成为生命科学研究和转化医学整体解决方案的品牌供应商。
凯基生物经过15年的发展,已从单纯的抗肿瘤基因治疗药物研发,成功转型为生物试剂和服务的专业供应商,目前正在进一步培育诊断试剂及转化医学服务新业务。
凯基生物15年,始终以技术、模式创新为根本,通过挖掘客户需求、整合行业资源,探索“产品、服务与专业孵化”协同发展的“平台型”商业模式,坚持以先进技术、规范管理为核心的专业化运营。未来,凯基生物将继续秉承“服务科学,造福生命”的企业发展理念,积极参与社会活动,履行社会责任。