石蜡切片结缔组织摩罗利染色试剂盒

石蜡切片结缔组织（CONNECTIVE TISSUE）摩罗利（mallory）染色试剂盒

产品说明书（中文版）

 

主要用途

 

石蜡切片结缔组织（CONNECTIVE TISSUE）摩罗利（mallory）染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和三色染料（trichrome），分析和区分存档中的石蜡包埋组织切片中的结缔组织成分 的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。广泛用于结缔组织、肌肉组织和胶原蛋白的研究等。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。

 

技术背景

 

结缔组织（connective tissue）是机体四类组织（包括上皮、肌肉、神经和结缔组织）中的一类。其中胶原蛋白是结缔组织中主要蛋白，占25％的总蛋白。结缔组织又分为疏松结缔组织（loose connective tissue）包括蜂窝组织（areolar tissue）、脂肪组织（Adipose）、网状纤维（reticular）；致密结缔组织（dense connective tissue）包括弹力纤维（elastic）；固有结缔组织（Connective tissue proper）包括纤维结缔组织，以及骨组织等。结缔组织染色使组织纤维呈现渐进型色差，其中胶原纤维显色是主要目标。基于摩罗利（mallory）应用三色系统的方法，因此称为摩罗利三色（trichrome）或三重（triple）染色。在三色复合染料体系中，使用酸性品红（acid fuchsin）、苯胺篮（aniline blue）和橙色G（orange G）等三色复合染料帮助显示各种器官组织切片中的支撑性胶原间质（supporting collagenous stroma），选择性地染色肌肉、胶原纤维、弹性纤维、纤维蛋白（fibrin）和红细胞等结缔组织成分，区分亲酸性（acidophilic）细胞外基质纤维和胞浆。  

 

产品内容

 

脱蜡液（Reagent A）         毫升

脱水液A（Reagent B）  毫升

脱水液B（Reagent C）  毫升

脱水液C（Reagent D）  毫升

脱水液D（Reagent E）  毫升

清理液（Reagent F）  毫升

品红液（Reagent G）  毫升

媒染液（Reagent H）       毫升

染色液（Reagent I）            毫升

产品说明书   1份

 

保存方式

 

保存在4℃冰箱里，避免光照；试剂具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证3月

 

用户自备

 

小型玻璃染色缸：用于组织或切片处理的容器

中性树脂：用于切片封片

光学显微镜：用于切片染色后观察分析

 

实验步骤

 

• 脱蜡处理

 

• 取出10片待测的5微米厚的石蜡包埋的组织切片 
• （选择步骤）放进80℃烘箱，孵育30分钟
• （选择步骤）室温下静置15分钟
• 按下表依次放进小染色缸里孵育

染色缸	孵育时间
xx毫升脱蜡液（Reagent A）	15分钟
xx毫升脱蜡液（Reagent A）	15分钟
xx毫升脱蜡液（Reagent A）	15分钟
xx毫升脱水液A（Reagent B）	3分钟
xx毫升脱水液B（Reagent C）	3分钟
xx毫升脱水液C（Reagent D）	3分钟
xx毫升脱水液D（Reagent E）	3分钟

 

• 小心移去切片上的脱水液D（Reagent E）
• 小心加上xx微升清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育5分钟
• 小心移去切片上的清理液（Reagent F）

 

• 样本染色处理

 

• 小心加入xx微升品红液（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育2分钟 
• 小心移去品红液（Reagent G）
• 室温下，小心将切片置入xx毫升清理液（Reagent F）中孵育2分钟
• 小心移去切片上的清理液（Reagent F）
• 小心加入xx微升媒染液（Reagent H）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育2分钟
• 小心移去媒染液（Reagent H）
• 室温下，小心将切片置入xx毫升清理液（Reagent F）中孵育2分钟
• 小心移去切片上的清理液（Reagent F）
• 小心加入xx微升染色液（Reagent I）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育15分钟 
• 小心移去染色液（Reagent I）
• 室温下，小心将切片置入xx毫升清理液（Reagent F）中孵育2分钟
• 小心移去切片上的清理液（Reagent F）
• （选择步骤）小心加上xx微升脱水液B（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：如果比氏液（Reagent I）染色过深，建议使用由此步骤开始的选择步骤，并快速操作）
• （选择步骤）小心移去切片上的脱水液B（Reagent C）
• （选择步骤）小心加上xx微升脱水液A（Reagent B）在切片上，铺满整个切片样品表面
• （选择步骤）小心移去切片上的脱水液A（Reagent B）
• （选择步骤）小心加上xx微升脱蜡液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
• （选择步骤）小心移去切片上的脱蜡液（Reagent A）
• 放上盖玻片或封片（中性树脂）
• 即刻在一般光学显微镜下观察：

 

注意事项

 

• 本产品为50次操作
• 操作时，须戴手套
• 试剂具有腐蚀性，注意操作安全 
• 建议使用玻璃染色缸
• 每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干
• 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面
• 整个操作，在避光状态下进行
• 染色完成后，即刻进行光学显微镜观察 
• 样品染色后保存，避免光照
• 本公司提供系列特定组织染色试剂产品

 

质量标准

 

• 本产品经鉴定性能稳定
• 本产品经鉴定显色清晰

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