Knock-out First基因敲除服务

“Knock-out First”是一种设计巧妙的基因打靶策略，它只需要构建一种特殊的基因打靶小鼠，就可以通过和不同的工具鼠交配，获得完全基因敲除的小鼠、条件性基因敲除的小鼠、带Reporter基因的基因敲除小鼠等三种类型，满足多方面研究基因功能和特性的需要。

具体策略如下：

首先，采用CGES技术，将“FRT-SA-EGFP-LoxP-NEO-FRT-LoxP”元件，以及第3个 “LoxP”元件，分别插入到一个内含子与下游的内含子中去。当获得基因打靶成功的小鼠后，

（i）若直接与Cre小鼠交配，可以去除第1与第3个LoxP位点间的序列，从而获得Reporter小鼠（目标基因会同时失活），即目标基因在何种组织与细胞中表达，细胞就会被EGFP荧光蛋白所标记(也可以根据一个需要替换成其它颜色荧光蛋白)；

（ii）若直接与全身性的Flp小鼠（如Actin-Flp小鼠）交配，可以去除第1与第2个Frt位点间的序列（包含第1个LoxP位点），从而获得条件型Flox小鼠；

（iii）如果再将Flox小鼠与组织特异性的Cre小鼠交配，即可获得组织特异性的基因敲除小鼠。

（A-B）通过“Knockout First”策略制备的嵌合小鼠，其毛色为棕色（Agouti）与奶油色（Cream）相间，含有较少或不含有黑色毛色；（C-D）上述嵌合小鼠与C57/BL6小鼠交配后获得的F1代小鼠，其毛色为棕色（Agouti）,证明ES细胞已经整合入嵌合小鼠的生殖系，并且传递到F1代。
 

“Knock-out First” 服务流程和周期：（9-12个月）

仁源生物技术（上海）有限公司（HumangenBiotechInc）是一家专门从事疾病动物模型制备研发的高科技生物医药技术企业。公司由多名留学美国的生物学与医学博士创建，拥有多项专利技术，在疾病动物模型制备方面具备丰富的经验。公司目前建有成熟的基于遗传操作的小鼠与斑马鱼模型制备技术平台，竭诚为广大从事生命科学与医学研究的用户提供疾病动物模型制备的技术服务。

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