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| 销售商： 济南丰核医药技术有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
- PCR 芯片简介
实时定量PCR是检测基因表达最灵敏、最可靠的方法，但只能检测少数几个基因的表达水平。若要检测大量基因，则工作量巨大，耗时长久。PCR芯片，克服了这一缺点，可同时进行多种基因检测，还可以节省数据分析时间，使研究者可以在更短的时间内得到更丰富的信息。PCR芯片可广泛用于生命科学、生物技术、疾病检测、临床医学和环境检测等领域，是近年生命科学领域常用的研究手段之一。随着研究的的段进展，需要研究的基因也在不断地更新换代，找到一张适合自己的PCR芯片，也就成为了实验成功的关键。
2、PCR 芯片的优越性
- 简单快捷：可同时检测几十到几百个基因；
- 灵敏度高：样本要求低，总RNA最少可为0.5ng；
- 重复性高：Ct值的平均差异只有1个循环；
- 数据全面、可靠：芯片包含的基因来自公共权威数据库、权威综述和相关文献挖掘；
3、PCR芯片主要实验流程
1.样品RNA抽提
2.DNase I 消化RNA样品
3.RNA纯化
4.RNA质量检测
5.cDNA合成
6.实时定量PCR
按照芯片说明将cDNA模板适当稀释后加入到实时定量PCR反应混合液中，然后在含有基因特异性引物的96孔板各孔中加入等量反应液，进行实时定量PCR反应。
7.数据分析
利用配套软件计算PCR芯片中的各个基因的Ct值，采用公认的ΔΔCt方法比较基因的表达变化。
a. 计算每个处理组中的每个通路相关基因的ΔCt 。
ΔCt(Ctrl) = average Ct – average of HK genes’ Ct for Ctrl array
ΔCt (Exp) = average Ct – average of HK genes’ Ct for Exp array
b. 计算2个PCR Array中每个基因的ΔΔCt。
ΔΔCt = ΔCt (Exp) - ΔCt (Ctrl)
c. 通过2ΔΔCt计算Exp（实验组）与Ctrl（对照组）间基因的表达差异。
8.提供实验报告
Excel芯片结果汇总表（包括芯片原始结果、数据分析和各种图表）
完整详细的实验报告
4、细胞凋亡相关研究
生物体内环境的稳定，不但依赖细胞增殖和分化，也依赖于细胞的凋亡。细胞凋亡（apoptosis）又称编程性死亡，是生物界重要的生命现象之一。从线虫至高等哺乳类动物，从胚胎至成人，从生理到病理，从生到死整个过程，体内不同的细胞多具有此种死亡形式。早在100多年前Carl Vogt 已发现这种死亡形式。1972年Kerr等人重新提出研究，并命名为凋亡（apoptosis）。其后在凋亡的形态学和生物化学等领域取得新的认识。
上海尔云综合近十年相关领域文献资料，结合专家建议，并借助特有的生信分析优势整合数据库与实验结果，让筛选的基因针对性更强。目前，尔云强力推出PCR芯片，根据近年来研究进展，严格筛选出相关基因。 PCR 芯片有96 孔和384 孔两种规格，96孔规格可同时检测91个基因。384孔PCR芯片检测基因更多。
5、细胞凋亡PCR芯片
上海尔云细胞凋亡PCR芯片有96 孔和384 孔两种规格，可以同时对几十到几百个与某一主题相关的基因进行分析。产品采用 SYBR Green实时荧光 PCR 方法。以 96 孔 PCR 芯片为例，基因专一性引物已分别固定在 96 孔 PCR 芯片中。只需要将反转录反应产生的 cDNA 与 PCR master mix 混合，再将混合物分配到 PCR 板的 96 个孔位，进行实时荧光 PCR 反应，就能轻松获得 91 个相关基因的表达情况。应用2块 96 孔 PCR 芯片分别对实验样品和对照样品进行分析，就能对91个基因的表达进行相对定量。每一块 96 孔 PCR 芯片设有 4个看家基因对照（β-actin, GAPDH, 18S, 28S），以方便在实验下选择稳定表达的参比基因，用于基因表达相对定量。每块 PCR 芯片还设有一个 PCR 阳性对照（Positive Control）。PCR 阳性对照用于质控 PCR 反应。
