DNA pull down技术概述-辉骏生物
DNA pull down-MS是体外研究DNA与蛋白互作的有力工具。该技术将生物素标记的DNA片段结合在链霉亲和素磁珠上,再与细胞核蛋白孵育,纯化出与DNA片段互作的蛋白,洗涤洗脱得到的蛋白产物,做western-blot检测特定蛋白是否与靶DNA片段结合;做质谱鉴定即可筛选出与DNA片段可能互作的蛋白信息(如具体某个或某些转录因子/组蛋白等)。
DNA pulldown技术原理-辉骏生物
生物素与链霉亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用;其中活化生物素可以在蛋白质交联剂的介导下,与已知的几乎所有生物大分子偶联。因此用生物素标记核酸后,利用生物素和链霉亲和素之间的亲和作用,可以纯化出各种生物大分子复合物。
DNA pull down实验首先针对靶标区域设计DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,洗脱得到DNA片段的结合蛋白质。
DNA pulldown技术应用-辉骏生物
目的DNA片段的互作蛋白(如转录因子等)筛选。
DNA Pull down技术服务参考文献
1.A requirement for breast-cancer-associated gene 1 (BRCA1) in the spindle checkpoint. Proc Natl AcadSci U S A 101(49):17108-17113(2004).
2.Identification of DNA-binding proteins that interact with the 5'-flanking region of the human D-amino acid oxidase gene by pull-down assay coupled with two-dimensional gel electrophoresis and mass spectrometry. J Pharm Biomed Anal 116:94-100(2015).
DNA pull-down实验活动声明-辉骏生物
1、活动时间:
2019.02.22—2019.03.22;非活动期间项目不享受相关优惠;
2、本活动最终解释权归广州辉骏生物科技有限公司所有。
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广州辉骏生物科技股份有限公司(原“广州辉骏生物科技有限公司”)成立于2008年,是一家为科研机构提供实验技术的专业公司,尤其擅长于蛋白质组学和分子生物学等技术。经过10多的不断努力与开拓进取,随着公司规模不断扩大,总部已经成功入驻广州黄埔区科学城国家级科技企业孵化器。
经过10多的不断努力与开拓进取,辉骏生物已经拥有一支经验丰富、优秀刻苦的蛋白质组学实验及蛋白核酸互作技术队伍。公司各类实验的技术人员均有着深厚的理论基础和丰富的实验经验。本公司秉承着严谨科学、优质高效、不断完善的服务理念,以蛋白质组学为中心,函括各类蛋白核酸互作、分子生物学、抗体测序等实验。面向生物医药企业、院校、科研机构、医院和个人,为生物医药研发、生命科学和医学研究提供全方位蛋白质组学实验解决方案。目前,我们已经与中科院华南植物研究所、广州肿瘤医院、中山大学、浙江大学、武汉大学、上海海洋大学、西南大学、厦门大学等全国60多家科研单位建立了广泛的项目合作。
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