DH5a大肠杆菌,农杆菌感受态细胞

DH5α Chemically Competent Cell

【保存】

-70℃保存至少24个月。

【产品说明】

DH5α化学感受态细胞经特殊工艺制作，非常规氯化钙方法制作，可用于质粒DNA和连接产物的转化，转化效率达108 cfu/ug DNA以上。

【用途】

用于质粒DNA扩繁，连接产物转化，蓝白斑筛选等。

【操作方法】

1．取适量的冰浴上融化的感受态细胞，加入目的DNA，混匀在冰浴上放置15分钟。

2．42℃热激45-70秒，然后快速将管转移到冰浴中2分钟。

3．向离心管中加入500ul无菌不含抗生素的LB培养基，混匀后置于37℃，200转/分钟培养40分钟。

4.  12，000 rpm离心30秒，弃掉上清，回流100ul LB培养基，悬浮沉淀菌体，用涂布棒均匀的涂布在添加特定抗生素的固体LB培养基上，倒置平板在37℃培养箱中过夜培养。

【建议用量】

质粒DNA转化20ul，连接产物50ul。

【注意事项】

感受态细胞避免反复冻融。

整个过程要无菌操作。

37℃摇菌时间不易过长。

【友情提示】

质粒DNA转化可以尝试热激冰浴后直接涂板，一样可以得到转化了质粒DNA的单菌落。

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