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Arraystar miRStar™Cancer Focus miRNA PCR研究配套试剂
美国Arraystar公司是非编码RNA研究领域的领导者, 近期Arraystar公司发布了创新性的miRStarTM miRNA PCR系统。康成生物提供miRStarTM芯片技术服务的同时,亦可为您定购miRStarTM系列产品,包括癌症特异性miRNA PCR芯片、miRNA第一链cDNA合成试剂盒、miRStar™ SYBR Green预混液和预验证的miRNA特异性PCR引物。
miRStar™癌症特异性 miRNA PCR芯片—聚焦于血清OncomiR
miRStar™ 癌症特异性miRNA PCR芯片含有184个与癌症密切相关的miRNA,每块384孔板上可以平行检测2个样品,如癌症样品 vs 正常样品。miRStar™ 癌症特异性PCR芯片是市场上对癌症相关的miRNA覆盖最全面、更新最及时的PCR芯片产品。更重要的是,芯片上涵盖的所有miRNA都在血清样品中进行过验证,因此非常适合于血清,血浆等临床样品中的癌症分子标志物的筛选。
图1. miRStar™ 癌症特异性miRNA PCR芯片排布,每块板可以检测两个样品(浅蓝色和深蓝色),miRNA详细列表同图2(黄色背景)。
miRStar™癌症特异性 miRNA & 靶基因 PCR芯片—同时检测miRNA和靶基因
miRStar™癌症特异性miRNA & 靶基因 PCR芯片涵盖了184个与胃癌,肝癌,肺癌,乳腺癌,卵巢癌,结直肠癌,胰腺癌,前列腺癌等常见肿瘤相关的miRNA以及178个这些miRNA的靶mRNA。通过这款芯片,客户可以平行的检测miRNA和靶基因,快速的了解miRNA与其靶基因的表达关系,从而揭示在特定样品中的miRNA-mRNA调控网络,以及miRNA作用机制和功能。
图2. miRStar™癌症特异性microRNA & 靶基因 PCR芯片包含的miRNA(黄色背景),mRNA(紫色背景)和内参(红色方框)。
miRStar™ miRNA第一链cDNA合成试剂盒
miRStar™ miRNA第一链cDNA合成试剂盒采用5’端腺苷酸化,3’端封闭的接头,可以高效的连接到小RNA 3’端的羟基上,从而为逆转录引物提供的一个通用的结合位点。这款产品具有高效,高特异性等优点,起始RNA量可以低至50ng,通过它合成的cDNA模板无需进行预扩增,可以直接用于后续的实时定量PCR检测。
图3. miRStar™ miRNA第一链cDNA合成试剂盒的工作流程。
miRStar™ 预验证的miRNA特异性PCR引物
miRStar™提供了278个预验证的miRNA特异性PCR引物。这些引物在血清,血浆样品中经过了严格的测试和验证(图3)。它们可以和miRStar™ miRNA第一链cDNA合成试剂盒中提供的通用引物一起组成引物对进行定量PCR反应,与miRStar™ SYBR Green预混液配合使用效果更佳。
图4. 在血清样品中,使用miRStar™ 预验证的 hsa-miR-142-3p特异性PCR引物的实时定量PCR扩增曲线(A)和熔解曲线(B)。熔解曲线呈现锐利的单峰,表明了反应具有很高的特异性。
miRStar™ SYBR Green预混液
miRStar™ SYBR Green预混液包含了实时定量PCR反应所需的所有成分:热启动Taq酶,SYBR Green I荧光染料,dNTP,稳定剂和缓冲液。客户只需加入cDNA模板和PCR引物就可进行实时定量PCR反应。miRStar™ SYBR Green预混液经过了特别的优化,具有超越同类产品的优秀性能(图5)。
图5. 使用miRStar™ SYBR Green预混液和竞争对手公司预混液的对比。使用miRStar™ SYBR Green预混液的PCR反应其熔解曲线是锐利的单峰(1,2),说明qPCR反应特异性好;而采用其它公司预混液的平行实验(3,4)则呈现出双峰或无峰,说明qPCR特异性差或无法有效扩增。
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