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Flag免疫共沉淀试剂盒-结合力更强-辉骏生物
英文名称:Flag Kit总访问:1682
国产/进口:国产半年访问:59
产地/品牌:辉骏生物产品类别:分子生物学试剂
规       格:888001 最后更新:2025-2-19
货       号:
CAS   号:
参考报价:flag试剂盒价格请联系辉骏生物:4006991663
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ChainFreeTM Flag标签免疫共沉淀试剂盒(动物)

 FI8801  12次/24次

 现货

 

 

 

 

 

 ChainFreeTM HA标签免疫共沉淀试剂盒动物)

 FI8806  12次/24次  现货

 ChainFreeTM Myc标签免疫共沉淀试剂盒动物)

 FI8807  12次/24次  现货
 ChainFreeTM GFP标签免疫共沉淀试剂盒动物)  FI8808  12次/24次  现货
 ChainFreeTM mCherry标签免疫共沉淀试剂盒动物)  FI8809  12次/24次  现货

 ChainFreeTM Flag标签免疫共沉淀试剂盒植物

 FI8811  12次/24次

 现货

 ChainFreeTM HA标签免疫共沉淀试剂盒植物)

 FI8816  12次/24次  现货

 ChainFreeTM Myc标签免疫共沉淀试剂盒植物)

 FI8817  12次/24次  现货
 ChainFreeTM GFP标签免疫共沉淀试剂盒植物)  FI8818  12次/24次  现货
 ChainFreeTM mCherry标签免疫共沉淀试剂盒植物)  FI8819  12次/24次  现货

 

ChainFreeTM 系列标签抗体免疫共沉淀试剂盒简介

       DNA重组技术使目标蛋白带上特定标签,表达的融合蛋白再采用标签抗体来检测,为科学研究带来了极大便利。常见的蛋白标签包括Flag、HA、Myc、V5等,这些标签分子量小,对融合蛋白的活性和细胞内定位几乎没有影响。 

        针对不同样本的需求,辉骏生物开发了分别针对植物和动物样本的5款ChainFreeTM标签抗体免疫共沉淀试剂盒:

 产品名称 识别的标签序列 磁珠偶联抗体
 ChainFreeTM Anti-Flag CoIP试剂盒  DYKDDDDK 优化并重组表达的无轻、重链的Flag抗体
 ChainFreeTM Anti-HA CoIP试剂盒  YPYDVPDYA 优化并重组表达的无轻、重链的HA抗体
 ChainFreeTM Anti-Myc CoIP试剂盒 EQKLISEEDL 优化并重组表达的无轻、重链的Myc抗体
 ChainFreeTM Anti-GFP CoIP试剂盒 GFP或EGFP绿色荧光蛋白 优化并重组表达的无轻、重链的GFP抗体
 ChainFreeTM Anti-mCherry CoIP试剂盒 mCherry红色荧光蛋白 优化并重组表达的无轻、重链的mCherry抗体

        实验前先将Flag标签、HA标签或GFP标签等与目标蛋白在样本中融合表达。裂解样本后,将标签抗体磁珠加入样本中,标签抗体与目标融合蛋白及其结合蛋白形成复合体,去除未结合的蛋白后,可以采用多种方法洗脱蛋白质。分离的蛋白产物既可以用Western blot检测已知蛋白,也可以用质谱(LC-MS/MS)鉴定未知蛋白。

 

免疫共沉淀CoIP试剂盒的应用方向

蛋白-蛋白间的相互作用是蛋白质发挥生物学功能的主要模式,蛋白质会通过结合不同的伙伴来行驶不同的功能,形成复杂的信号转导网络。CO-IP试剂盒采用Flag抗体磁珠、HA抗体磁珠、Myc抗体磁珠、GFP抗体磁珠或mCherry抗体磁珠捕获样本中天然结合的Flag融合蛋白、HA融合蛋白、Myc融合蛋白、GFP融合蛋白或mCherry融合蛋白,以及它们的互作蛋白,不需要购买诱饵蛋白的IP级别抗体,只需要在细胞或组织中表达融合flag标签的诱饵蛋白,即可以利用标签抗体完成内源性Co-IP实验。以下列举了可应用COIP试剂盒的几个研究方向:

1. 病毒、细菌等病原体侵染宿主细胞的机制;

2. 酶和底物的作用机制;

3. 天然状态蛋白调控复合体的研究。

 

 ChainFreeTM系列CoIP试剂盒-辉骏生物产品优势

1. 无抗体轻重链污染:IP复合物无论采用非变性洗脱还是变性洗脱,均不会出现抗体的轻、重链污染问题。

2. 亲和力强:低nM级别亲和力,轻松应对低拷贝基因,或难转染细胞系

3. 特异性强:抗体磁珠通过了20株以上的空白细胞系检测,不易产生非特异吸附

4. 结合量高:每10 µL抗体磁珠可结合约10~15 µg重组蛋白。

5. 兼容性好:无论标签在诱饵蛋白的N端或C端,都可以识别。

6. 稳定性好:通过了45℃高温测试。


RIP试剂盒(rna免疫共沉淀试剂盒)-辉骏生物-价格低大量现货.png

 

 

flag测试图2.jpg   V5 磁珠宣传图.jpg

辉骏生物ChainFreeTM标签抗体磁珠与其他同类产品对比图

Western-Blot结果显示:辉骏生物的ChainFreeTM 磁珠对诱饵蛋白的亲和力强,IP效果优于sigma产品,远高于国产同类磁珠效果,并且不会产生抗体轻重链污染。

 

温度测试.jpg

辉骏生物ChainFreeTM标签抗体磁珠稳定性测试图

Western-Blot结果显示:ChainFreeTM 磁珠在45℃条件下放置7天,稳定性几乎不受影响。
 

 

ChainFreeTM系列:Flag免疫共沉淀试剂盒组分
 试剂名称  体积12 Tests  体积(24 Tests)  保存条件

 ChainFreeTM Anti-Flag/HA/Myc/GFP/mCherry磁珠

 250 μL  500 μL  4 ℃
 裂解缓冲液  7 mL  14 mL  4 ℃
 漂洗液  25 mL  50 mL  4 ℃
 洗脱缓冲液  650 μL  1.3 mL  -20 ℃
 蛋白酶抑制剂  190 μL  380 μL  -20 ℃

 

Flag/HA/Myc/GFP/mCherry标签免疫共沉淀试剂盒使用流程简述

1. 裂解样本;

2. 样本裂解液与Flag磁珠(或HA磁珠、V5磁珠)孵育;

3. 漂洗、洗脱得到目标蛋白及其互作蛋白复合物。

 

Anti-Flag CoIP试剂盒使用案例

 

辉骏生物Flag免疫共沉淀试剂盒使用案例

Co-IP western-blot结果图

 

 

Flag免疫共沉淀(flag co-ip)试剂盒—客户文章

1. Li H.B. et al: The plant ESCRT component FREE1 shuttles to the nucleus to attenuate abscisic acid signaling. Nature Plants. 2019,IF=17.352.
【研究内容】:客户发现,作为内体蛋白分选转运复合体成分之一的FREE1基因,受到脱落酸刺激时候会发生磷酸化并移位到细胞核。客户利用酵母双杂交技术找到两个核蛋白ABF4 and ABI5会与FREE1结合,免疫共沉淀CoIP实验进一步证实了FREE与这两个蛋白的互作。后续实验表明,FREE1通过抑制ABF4、ABI5对下游基因的调控能力,参与了脱落酸信号通路。
使用相关技术:质谱鉴定、免疫共沉淀CoIP、Co-IP MS实验

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康雅虹 (180.117.242.141)
线虫cDNA调取
线虫某基因的cDNA调取,长度约4000bp。
2018-11-2 9:27:00

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