骨骼肌受体酪氨酸激酶自身抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
产品名称
通用名称:骨骼肌受体酪氨酸激酶自身抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:MuSK-Ab ELISA
产品规格
96T
MuSK-Ab试剂盒预期用途
试剂盒可定性和定量检测人血清中抗骨骼肌受体酪氨酸激酶自身抗体。
MuSK-Ab试剂盒检测原理
MuSK-Ab试剂盒是利用固相酶联免疫吸附检测试验(ELISA)。包被孔中包被了抗原。病人样本中的抗体连结到包被孔中的抗原,并通过信号放大系统检测出来。显色反应是通过结合到抗体的碱性磷酸酶催化的。生成的颜色强度与样本中相应抗体浓度成正比关系。定性或者定量结果分别通过临界质控或者标准曲线得到。
MuSK-Ab试剂盒组成成分
■微孔板 12×8
包被有高度纯化的重组MuSK蛋白
■酶联物 1×0.25ml
含碱性磷酸酶标记的特异性抗体
■抗血清 1×13ml
含抗人免疫球蛋白、稳定剂
■标准品A~E 5×12ml
即用型 浓度0、0.4、2.5、5、12U/ml
■阳性质控 1×1.2ml
红色 即用型
■阴性质控 1×1.2ml
绿色 即用型
■分析缓冲液 1×120ml
红色 即用型
■洗涤液 1×100ml
10倍浓缩
■底物液 1×13ml
即用型 含PNPP
■终止液 1×15ml
含1M NaOH、0.25M EDTA
MuSK-Ab试剂盒需要的材料(未提供)
- 移液器,体积5、10、20、50、100、1000µL
- 一次性的玻璃管(12×75 mm)
- 聚丙烯(PP)管(例如Sarstedt)
- 旋涡混合器
- 温育箱,37℃
- 8通道的移液器,带加样槽
- 洗瓶、自动或者半自动洗板机
- 酶标仪
- 双蒸水或去离子水
- 吸水纸、吸嘴和秒表
MuSK-Ab试剂盒检测步骤
1、移取100µL的标准品、质控品和稀释的病人样本至相应的微孔中,盖板。
2、在定轨摇床上(500rpm)室温(18-25℃)温育60分钟。
3、弃去孔中溶液。使用稀释的洗涤液每次250µL洗板3次,在吸水纸上拍干。
4、每孔加入100µL抗血清,盖板。
5、在定轨摇床上(500rpm)室温(18-25℃)温育60分钟。
6、弃去孔中溶液。使用稀释的洗涤液每次250µL洗板3次,在吸水纸上拍干。
7、每孔加入100µL已稀释的酶联物,盖板。
8、在定轨摇床上(500rpm)室温(18-25℃)温育60分钟。
9、弃去孔中溶液。使用稀释的洗涤液每次250µL洗板3次。在吸水纸上拍干。
10、加底物液和终止液建议使用8通道移液器。移取底物液和终止液应该为相同的时间间隔。避免气泡的生成。
11、每孔加入100µLPNPP底物液。轻轻摇动酶标板混匀溶液。
12、在室温(18-25℃)温育30分钟。
13、每孔加入100µL PNPP终止液终止显色反应。轻轻摇动酶标板混匀溶液。
14、在405nm处检测吸光度(参考波长为600—650nm),应在加入终止液后60分钟内读数。
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