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样本采集
采用血清或血浆 (EDTA 或肝素) 样本。样本收集后应尽快分离,长期储存需置于-20℃下,避免样本反复冻融。
整个实验应使用相同的样本类型。
参考文献
1. Risteli J, Risteli L 2006 Products of bone collagen metabolism. In: Seibel MJ, Robins SP, Bilezikian JP, editors.Dynamics of bone and cartilage metabolism. Principles and clinical applications, second edition. London:Academic Press. p. 391-405.
2. Melkko J, Kauppila S, Niemi S, Risteli L, Haukipuro K, Jukkola A, Risteli J 1996 Immunoassay for intact aminoterminal propeptide of human type I procollagen. Clin Chem 42:947-954.
3. Chen P, Satterwhite JH, Licata AA, Lewiecki EM, Sipos AA, Misurski DM, Wagman RB 2005 Early changes in biochemical markers of bone formation predict BMD response to teriparatide in postmenopausal women with osteoporosis. J Bone Miner Res 20:962-970.
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5. Nenonen A, Cheng S, Ivaska KK, Alatalo SL Lehtimäki T, Schmidt-Gayk H, Uusi-Rasi K, Heinonen A, Kannus P, Sievänen H, Vuori I, Väänänen HK, Halleen JM 2005 Serum TRACP 5b is a useful marker for monitoring alendronate treatment: comparison with other markers of bone turnover. J Bone Miner Res 20:1804-1812.
6. Parikka V, Peng Z, Hentunen T, Risteli J, Elo T, Väänänen HK, Härkönen P 2005 Estrogen responsiveness of bone formation in vitro and altered bone phenotype in aged estrogen receptor- deficient male and female mice. Eur J Endocrinol
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7. Hale LV, Sells Galvin RJ, Risteli J, Ma YL, Harvey AK, Yang X, Cain RL, Zeng Q, Frolik CA, Sato M, Schmidt AL, Geiser AG 2007 PINP: A serum biomarker of bone formation in the rat. Bone, in press.
样本保存条件和时间
血浆/血清
室温 4小时
4-8℃ 无数据
-20℃ <18个月
预期目的
大/小鼠I型原胶原N端前肽检测试剂盒是首个用于定量测定啮齿动物血清和血浆中I型原胶原N端前肽的商业化试剂盒。它也可检测细胞培养媒介物。该试剂盒仅用啮齿动物模型的科学研究。
生理学
I型胶原的生成是骨形成过程中的一个重要步骤,它是骨基质中的主要有机成分。I型原胶原氨基端前肽
(PINP)来源于胶原合成过程中与胶原同等数量的I型原胶原分子。在胶原合成中,前肽是从与胶原等分子浓度的前胶原分子N端和C端末裂解下来的。因此,定量测定PINP可测定胶原合成和/或骨形成状态。
I型原胶原氨基端前肽(PINP)是反映成骨细胞活性的一个可靠标志物,它只在骨形成过程中释放,与人来源的PINP的交叉反应<5% 。大/小鼠I型原胶原氨基端前肽检测试剂盒是商业化的用于非灵长类物种PINP检测的试剂盒,主要用于新药和新疗法研发临床前研究中定量测定骨形成。
实验举例
3月龄雌性大鼠(Sprague-Dawley)随机分成三组:(1)假手术组(n=12),(2)卵巢切除术组(OVX)(n=12),(3)卵巢切除后皮下注射17-雌二醇组(10g/kg/天)(OVX+E2)(n=12) 分别于手术前禁食过夜后及手术后的第5、14、28、56天收集血清样本,采用大/小鼠PINP酶免试剂盒对其进行测定。
大/小鼠PINP酶免试剂盒可快速检测出卵巢切除术诱导的骨形成的升高.手术后后两周内PINP水平比手术前升高283%。这种骨形成方面的升高可完全由雌二醇来抑制。
结论:通过使用大/小鼠PINP酶免试剂盒测定血清PINP水平,可检测到大鼠卵巢切除术诱发的骨形成方面的变化。
试剂盒信息
货号: AC-33F1
预期用途: 科研
规格: 96孔
方法学: 酶联免疫法
每个试剂盒的检测人份: 40人份(双孔)
标准品: 6个
质控品: 2个(预稀释)
样本类型: 血清、血浆(肝素或EDTA)
细胞培养液
样本容积: 5μL 预稀释1:10
最小检测浓度: 0.7ng/mL
可反应种物种: 大鼠、小鼠
检测范围: 0.7-75ng/mL
精确度:
批内差: <8%
批间差: <10%
总检测时间: 2小时
手工处理时间: 30-45分钟
数据处理: 4参数曲线拟合
在架时间: 长达12个月