预期用途
用于传统染色法和培养基ELISA(CrossLaps)骨破坏重吸收的体外精确检测.
产品简介
骨是一种很有活力的组织,在人的一生中都在不断地重建。现已证实,在骨中存在一些特殊物质,能够影响到破骨细胞的活性。因此在北欧生物科技公司,我们使用高质骨而不是牙质应用于研究。现在将向我们的客户提供此类服务。
每批骨切片通过重吸收检测法来测试其质量。在该检测中,由骨切片上产生凹点证明破骨能力。随后用培养基酶免吸附试剂盒Crosslaps检测上清液。只有当两项测试都呈阳性时,该骨切片才能用于进一步的重吸收检测。
破骨细胞产生凹点的活性通过人破骨重吸收方法检测。对破骨重吸收的定量分析可以采用传统的对凹点染色方法,亦可使用培养基酶免吸附检测法Crosslaps,两者关系见图1与2。
由于破骨细胞实验往往需要较大量的蛋白质,而从牛骨切片中提取的蛋白质用于96孔板,北欧生物科技公司开发了能够完全适用于6,12,24,48孔板的骨皮质切片。如图3所示。
将人破骨细胞分散覆盖于牛骨皮质片上,然后加入不同浓度的抗重吸收剂(A: 90 μM, B: 30 μM, C: 10 μM, D: 0 μM)。第6天取等量细胞培养上清液用于检测胶原c端交联肽(ctx)的量(培养基ELISA-CrossLaps),从骨片上转移破骨细胞并且用阻凝蛋白苏木精染色,形成可见的凹点(图1)。
北欧生物科技公司正使用这种6孔板大骨片(GBS)来提取破骨细胞蛋白,这些破骨细胞在骨上而非塑料上培养,对蛋白质的表达是有影响的(数据未列出)。要进行破骨细胞的基因描述实验时,我们推荐使用这些底物提取RNA。从骨切片分离RNA的方案和人破骨细胞的培养方案可根据要求制定。
来源
骨切片由牛股骨的皮质部分制成,完全适合96孔板,直径6mm,大概200μm厚。
储存
骨切片保存于4°C下70%乙醇中。为了保持骨切片的质量,应缩短使用周期和避免室温下放置。
处理
我们推荐在转移至96孔板之前,先将骨切片置于含培养基的10%血清中清洗三次。
培养
重吸收实验一般持续72小时(见图2)。然而在加入试剂到破骨细胞培养液中16或24小时后,就可观察到细微的变化了,甚至8小时后即可用optimised方法观察到。
特征
与凹点染色和划线不同,培养基酶免吸附法Crosslaps不要求破骨细胞培养的终止。因此,可以从相同的股切片中获得几个样品,从而使互换性检测特定物质影响下的破骨细胞活性成为可能。材料的处置与常见细胞培养物的处置相同。
参考文献
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广州固康生物科技有限公司是一家专业从事体外诊断试剂研发和销售的高科技企业。公司主营产品有骨代谢系列酶免试剂盒和相关抗体、传染病系列试剂盒、肿瘤系列试剂盒、不孕不育系列试剂盒、自身免疫系列检测试剂、消化道系列检测试剂等。
2006年公司与国外合作成功开发了丙氨酸氨基转移酶检测条(ALT,干化学法)、HLA-B27磁酶免检测试剂盒等产品并成为这两个产品的全球总经销商。
自2006年11月以来,公司先后成为英国IDS公司(全球领先骨代谢和软骨分析标志物生产商)、以色列SAVYON公司(全球领先肺衣、肺支、霉菌生产商)、德国BIOSERV公司(专业侧重不孕不育)、美国OCT公司(骨标志物OPG)的中国华南、华东、华北、东北、西南、西北、香港、澳门地区总代。2007年3月成为德国Preventis公司(快速检测试剂)的中国总代理商,2008年6月成为芬兰Pharmatest公司(临床前委托研究:骨质疏松症-肿瘤-骨关节炎)的中国总代理商。
芬兰药物检测服务公司(Pharmatest Services Ltd.,简称Pharmatest)是一家专业从事骨生物学研究的临床前委托研究服务公司,主要为骨质疏松症、肿瘤诱导的骨疾病和骨关节炎的新药药效临床前检测提供全方位的委托研究服务。当前服务包括产品定制,可以满足任何人研发治疗各科骨疾病新药的特殊需求。公司研发一系列独特的装置为新药成分临床前效用检测提供快速、可靠的服务。这些服务包括:
体外骨细胞检测定:
-OCL检测:人破骨细胞分化和人/大鼠破骨细胞活性测定
-OBL检测:小鼠成骨细胞分化和活性测定
骨质疏松动物模型:
-OVX检测:大鼠卵巢切除术模型
-ORX检测: 大鼠睾丸切除术模型
-GIOP检测:糖皮质激素诱导骨质疏松小鼠模型
-IMM检测:大鼠废用性骨质疏松模型
肿瘤模型:
-METS检测:小鼠肿瘤骨转移模型
-INV检测:体外肿瘤侵袭测定
其他服务:
-ADMET检测:ADME测定和基础毒理学检测
-OA检测:兔骨关节炎模型
-CLIN检测:临床骨标志物分析服务
此外,公司还将进一步引进国内外最先进技术和产品,协助促进中国医疗诊断装备和水平,从而提高国民疾病预防和预后能力。
我们的宗旨
卓越和超越
我们的服务理念
质量至上,积极拓广技术应用并努力促成操作合理化
我们的运营理念
诚实守信、专注市场需求趋势、保护客户利益
我们的使命
以科学为基础、质量为保证、市场为导向竭诚为全人类的健康服务。