众所周知,细胞复苏是细胞低温保存的关键步骤之一,对细胞活性和功能有重大影响。
近日,原能细胞联合美国华盛顿大学国际医学与生物工程院院士、国际冷冻生物学协会主席高大勇教授团队,以人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)为研究重点,解读不同温度复苏对PBMCs活率、回收率、增殖能力和T细胞应答能力等的影响。
其研究成果文章:“Effect of Warming Process on the Survival ofCryopreserved Human Peripheral Blood Mononuclear Cells”,发表在国际生物样本库协会官方杂志《Biopreservation and Biobanking》杂志上。
复苏温度对PBMCs活性的影响
PBMCs(人外周血单个核细胞),是目前免疫治疗领域的高热度细胞,也是基础研究和临床研究中非常重要的生物样本。虽然各大细胞库和机构建立了完善的深低温存储体系,但对低温保存的PBMCs复苏的升温过程缺乏了解和优化,而这是全球细胞/免疫疗法所亟需解决的问题。
该研究考察了不同温度复苏对PBMCs活性和功能的影响。PBMCs样本经过慢速冷冻后,存储在液氮罐中,分别在不同温度(37℃、42℃和65℃)下复苏。实验发现:PBMCs样本在65℃下进行水浴复苏,相比于37℃和42℃复苏,可以显著降低复苏所需要的时间,从而减少其在复温过程中因重结晶和潜在的玻璃化造成的低温损伤,保持了PBMCs各亚群的比例不变,维持了T细胞的活化和增殖能力,缩短了复苏时间,提高了细胞的活率和回收率以及T细胞在抗原刺激后细胞因子的分泌能力。
65℃下复苏可显著提高PBMCs的活率和回收率
65℃下复苏可显著提高PBMCs的活率和回收率
不同温度复苏可维持T细胞活化能力不变
65℃下复苏可显著提高在抗原刺激下T细胞分泌细胞因子的能力
靠谱的“CR-200细胞复苏仪”
四大优势,细胞复苏的好帮手
智能精准控温,可靠稳定
内置水温加热程序,保障水温精准可控,为样本提供可靠、稳定的复苏环境。
自动机械作业,均衡可控
自动化纯机械振动实现对低温样本的稳定复苏,转速精准可控且均衡。
自动加水,精准设置不同水位
精准设置不同水位,水位调节范围:0-70mm(以底部挡板为零位)。具有自动加水功能。当水位低于设定值时,系统自动加水;反之则自动排水。
预设+自定义,一键复苏,数据可追溯
可系统预设+自定义各种参数, 一键即可下达复苏指令,操作便捷高效;且复苏参数与样本信息有效绑定,数据可溯源。
CR-200细胞复苏仪,即成为本次研究中的核心角色。据团队人员介绍,在进行样本复温实验中,难度最大的即是复苏温度精度的控制。传统的手工复苏模式,不但费时费力,且精确度难以保证。