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戊巴比妥钠半数有效量(ED50)的测定
点击次数:126 发布日期:2018-9-14  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负

一、 实验目的和原理


测定戊巴比妥钠( 57-33-0) 腹腔注射对小鼠催眠作用的 ED50值。 戊巴比妥钠为巴比妥类镇静催眠药,用适当剂量给小鼠腹腔注射后产生的催眠效应, 常用翻正反射的消失来判断, 该指标仅有阳性( 睡眠) 和阴性( 不睡眠) 两种现象, 属于质反应。 质反应量效曲线的横坐标为对数剂量, 而纵坐标采用阳性反应发生的频数时, 一般为常态分布曲线。 如改用累加阳性频数为纵坐标时, 可以得到标准的 S 型曲线。 该曲线的中央部分( 50%反应处) 接近一条直线, 斜度最大, 其相应的剂量也就是能使群体中半数个体出现某一效应的剂量, 通常称为半数效应量。 如效应为疗效, 则称半数有效量( ED50) ; 如效应为死亡, 则称半数致死量( LD50) 。 这些数值是评价药物作用强度和药物安全性的重要参数。 021-51602548
孙氏改进的 Kaerber 法的设计条件是: 各组实验动物数相等, 各组剂量呈等比数列, 各组动物的反应率大致符合常态分布。

 

若以 Xm 为最大反应率组剂量的对数, i 为组间剂量比的对数, p 为各组反应率, Pm 为最高反应率, Pn 为最低反应率, n 为实验组数, 则:ED50= lg-1[Xm- i( ∑ P- 0.5) + i/4( 1- Pm- Pn) ]含 0%及 100%反应率时,ED50= lg-1[Xm- i( ∑ P- 0.5) ]ED50的 95% 可信限= lg-1( lgED50± 1.96· S)其中 S= i

 

二、 实验材料


小鼠 50 只, 1% 戊巴比妥钠( sodium pentobarbital solution) 小鼠笼, 天平, 0.5ml 或 0.25ml 注射器。

 

三、 实验步骤


1、确定给药剂量:先以少量动物做预实验,以获得小鼠对戊巴比妥钠催眠反应率为 100% 的最小剂量( ED100)
和反应率为 0% 的最大剂量( ED0) 。 然后在此剂量范围内, 按等比数列分成几个剂量组( 一般 4~ 8 组) ,
各组剂量的公比( r) 为 r= n-1√ ED100/ED0
求得 r 后, 自第一剂量组( ED0) 开始乘以 r, 可得相邻的下一个组的剂量。 若共分为 5 个组, 各组剂量分
别为 ED0、 r· ED0、 r2· ED0、 r3· ED0、 r4· ED0、 r5· ED0。
2、 给药: 取体重 25g 左右的健康小鼠 50 只, 查随机数字表, 随机分为 5 个组, 每组 8 只(除去极端重量小
鼠 2 只)。 按表 1 所列的各组给药浓度分别腹腔注射 0.1ml/10g。
3、 记录结果: 以翻正反射消失为入睡指标, 观察药物的催眠效应, 记录各组腹腔注射后 15min 内睡眠鼠数,
填入表 1。

四、 实验结果


表 1 计算戊巴比妥钠 ED50用表



 

根据表 1 的数据和上述公式可求得 ED50=31.90

 

注意事项


1、 为减少误差, 由 1 人配药
2、 保持环境安静
3、 如果第一组出现阳性动物, 则向下按公比增加一个低剂量组(d0=d1/r)
4、 最后一组动物未全部阳性, 向上增加一个剂量(dk+1=dkr)

实验动物的麻醉方法,除了使用戊巴比妥钠进行注射麻醉,还可以选择使用异氟烷气体麻醉:

 

小动物气体麻醉机

 

 

 

来自:玉研仪器公司

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