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无血清快速细胞冻存液操作说明书
点击次数:266 发布日期:2018-11-2  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负

无血清快速细胞冻存液,通用于各种动物细胞株。特别配方具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白,能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存,也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。

产品特色
1.高安全性,完全使用医药品等级原料进行生产,不含动物成分,病毒、霉菌和支原体等污染可能性低,各批产品之间有更高的产品质量一致性。
2.细胞存活率高,无批次差异。
3.完全冻存液配方,可直接使用,方便简捷,可直接存放于-80℃冰箱冻存,无需经过费时的程序降温过程(省时、省力、省钱)。

冻存液成分
无血清细胞,无血清干细胞及MSC冻存液

保存条件
储存于4℃以下。质量保障期从产品的生产日期起,为期3年。3个月以上没有使用冻存液计划时,尽可能冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低,推荐将100 ml产品分装小瓶后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。

使用方法
细胞冷冻保存方法
选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。
1.按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。
2.按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。
(参考:5×105至5×106 cells/ml)。
3.取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量,置于离心管中,离心收集培养细胞(参考离心条件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去离心管中的上清液。
4.加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度为5×105至5×106 cells/ml。缓慢地混合均匀,制成细胞混合液。
5.将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。
6.直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱,长期冷冻保存。
7.若研究者需要液氮保存时,可将完全冻结的冻存管(放入-80℃冰箱后至少一昼夜)移至-196℃液氮罐。

冻存细胞复苏方法
1.从冰箱里取出细胞冷冻保存管,立即放入37℃振动水浴槽中快速解冻。
2.待冻存管中细胞混合液完全融化后,立即加入1 ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合,再将细胞混合液从冻存管中移入含有9 ml该细胞培养基的试管中,混合均匀。
3.离心收集培养细胞(参考离心条件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min),移去上清液。
4.清洗细胞,充分洗净残留冻存液。
5.加入适量的新鲜细胞培养基,使用移液管缓缓地均匀细胞混合液。适量地稀释后,将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。
6.镜检后,研究者可根据各自方法和需要来进行细胞培养。

复苏细胞存活率

细胞株 冻存时间(月) 细胞存活率(%)
(冻存温度-80℃)
293 12 97.6
Sp2/0 12 92.0
CHO-S 12 98.2

● 最好用处于对数生长期的细胞进行冻存。
● 控制好胰酶的消化时间,切记消化过度,会影响细胞复苏效果。
● 重悬细胞的过程中,请务必要轻柔,以免损伤细胞,但同时也一定要充分重悬,这样细胞在复苏时才不会成团。
● 细胞操作请注意无菌
 

来源:上海一基实业有限公司二部
联系电话:021-60548336
E-mail:2851331332@qq.com

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