厂商 仪器 试剂 服务 新闻 文章 视频 高级搜索
当前位置 > 首页 > 技术文章 > 顶空气相色谱法测定阿米舒必利中有机溶剂残留量
选型 | 市场 | 应用 | 使用 | 法规 | 技术 | 其他
顶空气相色谱法测定阿米舒必利中有机溶剂残留量
点击次数:376 发布日期:2018-6-14  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负

1.前言

人用药品注册技术要求国际协调会议( InternationalConference of Harmonizition ICH)对药品残留溶剂有明确的定义以及相关的指导原则。 ICH 将药品生产及纯化过程中常用的69 种有机溶剂按照对人体和环境的危害程度分为4类。第I类溶剂是指已知可以致癌并被强烈怀疑对人和环境有害的溶剂, 其残留量必须控制在规定的范围内;第II类溶剂是指无基因毒性但有动物致癌性的溶剂;第3类溶剂是指对人体低毒的溶剂;第4类是尚无足够毒理学资料的溶剂(1-3)。阿米舒必利在提取过程中使用了有机溶剂甲醇和丙酮,按照上述指导原则,甲醇为第二类溶剂,其含量不能超过0.3%;丙酮为第三类溶剂,其含量不能超过0.5%。

本文介绍了用赛默飞世尔气相色谱仪 (带FID检测器)和Triplus顶空自动进样器分析阿米舒必利中这两种有机溶剂残留的分析方法,方法学的验证表明,该方法准确有效。

2.实验方法

2.1 仪器和试剂

Trace GC气相色谱仪(赛默飞世尔科技 Thermo Fisher Scientific公司),带FID检测器;色谱柱为TR-V1 (30m x.25 mm x 3μm); Triplus HS自动进样器(赛默飞世尔科技Thermo Fisher Scientifc公司)甲醇和丙酮 (色谱纯)购置于sigma公司; N, N-二甲基甲酰胺 (DMF,分析纯)。

2.2 色谱条件

程序升温:初始温度:40 ℃(60 min), 升温速率:30 ℃/min至200 ℃(3min)
载气:恒流模式,流速为3ml/min
进样口: 150℃,分流进样,分流比为10: 1
检测器温度: 250℃
顶空参数设置:
孵化器温度: 75℃
孵化时间: 30min
进样量: 1ml

3.结果与讨论

3.1系统适应性

因待测药品的残留溶剂主要是甲醇和丙酮,因此选择上述2种有机溶剂,溶解在DMF中考察系统适用性,典型色谱图见图1。结果显示,在上述色谱条件下,各溶剂分离完全。

图1

3.2 顶空参数优化

3.2.1 孵化器温度

分别取5mg甲醇和丙酮,溶于一定量的DMF中,使溶液的最终体积为5ml。平行制备4份相同浓度的待测样品,将孵化器的温度分别设置为65℃, 75℃,85℃和95℃,以此判断不同孵化时间对检测结果的影响。结果(如图2)表明,随着孵化温度的升高,丙酮的峰面积也在增加,但是甲醇的响应却是在75℃时为最高,这与国家药典中推荐的孵化温度相一致(75℃~85℃)。并且,由于阿米舒必利的化学名为4-氨基-N-[(1-乙基-2-吡咯)甲基]-5-已砜基-2-甲氧基苯甲酰胺,黄仕璋等(4) 通过研究表明,含甲氧基的样品在较高顶空温度下降解产生甲醇,而裂解速率主要受温度影响,随着样品孵化温度的增高,甲醇的含量也会显著的增高,因而影响了真实的检测结果。因此在检测时,我们将孵化器的温度设为75℃。

3.2.2 孵化时间

分别取5mg甲醇和丙酮,溶于一定量的DMF中,使溶液的最终体积为5ml。平行制备4份相同浓度的待测样品,将孵化器的温度分别设置为10min, 20min, 30min和40min,以此判断不同孵化时间对检测结果的影响。结果(如图3)表明,随着孵化时间的升高,丙酮和甲醇的峰面积均变化不大,考虑到样品中的有机溶剂可能需要较长的时间才有利于其挥发,因此我们将孵化时间设为20min。

3.3标准曲线、检出限和精密度

本方法采用外标法定量,由于做顶空进样,考虑到不同样品体积对气体的膨胀有影响,所以这里以目标组分的峰面积Y对相应组分的绝对重量做标准曲线(5mg、 1mg、 500ug、 100ug和50ug),图4A和B显示,在这个仪器方法上甲醇和丙酮都有非常好的线性关系。以500ug为例,按信噪比为3计算得到甲醇的检出限为1.5ug, 丙酮的检出限1ug。配置甲醇和丙酮均为500ug平行的标样5个,计算方法的重现性,得到甲醇的RSD值为3.76%,丙酮的RSD值为1.39。

3.4 样品检测

精密称取1g样品,用10ml容量瓶定容,取5ml放入顶空瓶中,按照上述方法进行样品检测,每个样品平行进四次(谱图如图5所示),结果如下表所示。按照ICH的标准,甲醇的为第二类溶剂,含量不能超过0.3%,丙酮属于第三类溶剂,含量不能超过0.5%,待测样品中的溶剂残留经检测分别为甲醇0.004%和丙酮0.05%,符合ICH的标准。

3.5 回收率实验

精密称取上述样品粉末0.5g,准确加入500ug甲醇和丙酮,最后用DMF定容到5ml,之后进行样品检测,每个样品测定三次 (样品加标如图6所示),最终测得甲醇和丙酮的平均回收率分别为98.4%和101.7%。

3.6 注意事项

所有样品溶解以及标样配置的过程需在冰上进行操作,防止有机溶剂挥发所引起的结果误差。

参考文献:

1. 周海钧主译1 药品注册的国际技术要求?质量部分[M] 北京:人民卫生出版社, 2000: 82
2. 中国药典[ S] . 二部, 2000:附录54
3. Residual Solvent Testing: A Review of Gas-Chromatographic and Alternative Techniques. Pharmaceutical Research, 2003,20(3): 337-344
4. 头孢西丁钠中甲醇残留量的顶空毛细管GC法测定.中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2007, 38(10): 727-728

来源:赛默飞世尔科技(色谱与质谱)
联系电话:4006119236
E-mail:menglu.xing@thermofisher.com

网友评论 已有[0]人评论
用户名: 密码: 匿名 快速注册 忘记密码
评论只代表网友观点,不代表本站观点。 请输入验证码: 8795
Copyright(C) 1998-2018 中国生物器材网 电话:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com