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MD发布实验应用,进行更高水平的细胞因子检测
点击次数:850 发布日期:2018-9-10  来源:本站 本站原创,转载请注明出处

 

充分发掘微孔板读板机特点及优势
——进行更高水平的细胞因子检测

 

众所周知,目前人类许多疾病的发生过程都或多或少与细胞因子变化有关系,如肿瘤、糖尿病、神经退行性疾病等等。细胞因子(Cytokine,CK)其实就是一类能在细胞间传递信息,可分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、生长因子和趋化性细胞因子等六类。


正常情况下,细胞因子的表达和分泌受机体严格的调控,但在病理状态下,细胞因子会出现异常性表达。例如细胞信号转导通路的变化,其发生过程涉及到细胞膜或细胞内受体接受细胞外的分子信号刺激,这些细胞外的分子信号就包括细胞因子、激素、生长因子等等,我们可以通过细胞因子的检测来诊断某种疾病的发生。


细胞因子检测主要基于免疫学检测方法、生物学检测方法和分子生物学检测方法,三种检测方法各有优劣,如生物学检测方法中利用动物模型来检测细胞因子的含量变化,可反映动物体内生物活性、参考价值大,不足之处在于成本较高、步骤繁琐等,所以应用较少。


目前较为被大家所常用的方法是免疫学检测法和分子检测法,而免疫学检测方法更为常用。包括ELISA法、免疫斑点法、免疫荧光法、RIA检测方法等,其中最广泛使用的就是ELISA法。与之配套检测的多功能酶标仪/检测系统,因其具有光吸收、荧光、发光、荧光偏振和时间分辨荧光等多种检测功能,我们不仅可以利用其光吸收功能针对细胞因子进行ELISA,也可借助其荧光功能或荧光偏振功能针对微量表达的细胞因子进行高通量、高灵敏度的检测。市面上已相继开发出针对不同需求不同目的应用的ELISA试剂盒。

 

 

如Sword ELISA Boosters,是由Sword Diagnostics 公司开发出的新一代荧光ELISA 检测技术,它可直接替代作为金标准的传统光吸收ELISA 检测试剂,将灵敏度提升30倍。原理是基于Sword 分子在辣根过氧化物酶 (HRP) 存在下转化为共振拉曼活性底物,共振拉曼信号则在微孔读板机上检测。由于在低浓度下有着极高水平的酶/底物相互作用,产生出更多的共振拉曼活性分子,从而增强了实验的性能表现。

 

 

传统的ELISA技术虽然在灵敏度上不及荧光及荧光偏振等方法,但是新的技术的加入使得较传统检测的时间大大缩短,如Abcam公司的 SimpleStep ELISA 试剂盒,它可将 ELISA 实验时间从 260 分钟减少到 90 分钟,保证实验的灵敏度和重复性。

 

 

以上可见,多重检测手段结合全新检测技术,能让我们在经典方法的基础上持续发掘出更灵敏、更快捷的方式,以满足我们更高的检测需求。

 

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