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Tecan Infinite 酶标仪助力中药活性成分的研究
点击次数:4605 发布日期:2018-5-23  来源:本站 本站原创,转载请注明出处

中医和草药,与针灸、按摩、运动及食养一起,为治疗许多病症提供了替代方案。尽管有超过2,500年的知识传承和经验,这些草药的作用方式却鲜为人所知。目前,浙江大学药学院正通过现代的实验技术来识别这些药物背后繁杂的活性成分,以及成分之间的协同作用。

 

许多现代药物,从阿司匹林、可待因到化疗药物紫杉醇(Taxol®),都是从天然原料中提取的。实际上,从1981至今,接近50%的经过临床验证的药物都是直接或间接从天然产物中提取而来(1)。随着小分子药物研发管线的低迷,许多公司开始转向植物药产品,作为新的原料药的来源。而问题在于,只有非常少的中药经过研究,得以识别其中的有效成分。

浙江大学药学院正在分析超过300种中药,致力于揭示传统医药的秘密。王毅教授解释道:“我们最主要的挑战,就是几乎所有的草药提取物都具有非常复杂的化学组成。利用色谱分离后,经常会得到成百甚至上千种成分,这使得确认有效成分,或有效的成分组合非常困难。对此,我们先分离出粗提物,再把这些粗提物按照大小、亲水性等进一步分离成单个组分。在过去的10年里,我们已经建立了超过30,000种组分的成分库。我们用它对细胞或者特定的分子靶标进行筛选。”

 

“我们使用了Infinite F200多功能酶标仪进行了大量的筛选实验,包括一些细胞毒性实验来识别抗肿瘤和抗氧化成分。Infinite酶标仪的使用非常简便,并且配有自动加样模块,这让我们可以快速的筛选大量的成分。近期,为了扩展筛选的通量,我们又购置了配备光栅的Infinite M1000,帮助我们实现更加灵敏、更加灵活的新应用。”
“Infinite M1000可以按照需要选择波长。我们设计了几种荧光探针,能够报告特定酶活性的上调或者下调。举个例子,我们成功地设计了一个针对去乙酰化酶(sirtuin)1活性的探针。去乙酰化酶被认为是一类在细胞内起调控作用的蛋白,而这种蛋白过去是无法利用光谱方法检测的。我们使用这个探针测试了近200种可能对去乙酰化酶有激活或抑制作用的备选成分,并找到了13种有效成分。相比随机筛选来说,命中率相当的高。”

王教授继续说道:"许多中药似乎是依赖多项成分之间的协同作用,而非依靠单一组分。尽管我们已经找到许多有效的单一组分,但是大多数情况下,它们的药效比相似的、国际上已经注册的小分子药物要弱一些。反过来,一些组分的协同作用,能够产生更大的细胞反应。研究药物的协同作用,需要准确无误地将微量的多种药物以复杂的组合移入微孔板,人工操作是非常困难的。幸运的是,作为访问学者在美国波士顿的麻省总医院工作期间,我得以使用D300皮升级超微量加样器进行抗癌药物的筛选。这真的是一种非常强大的药物筛选工具,它的数位分配技术能够对体积极小的成分进行非常准确的分配。所以当我一回到中国,它就成为了我首先想要购置的仪器。
 
Tecan D300e 超微量数码加样仪

“D300最大的优势是它能够根据设定,自动计算每一种组分在每一个孔内的移液体积,并准确进行分配。它的准确性和重现性非常好,特别是对于非常敏感的细胞活性实验,它能够得到非常漂亮的量效关系曲线,来帮助我们选择最好的药物成分配比。”
 
1) Newman, DJ, Cragg, GM. Natural products as sources of new drugs over the 30 years from 1981 to 2010. J Nat Prod, 2012, 75(3), 311-35.
发布者:帝肯(上海)贸易有限公司
联系电话:+86 21 2206 3206
E-mail:info.cn@tecan.com


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