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MD提供实验方案下载-毒性化合物对神经系统相关作用
点击次数:1835 发布日期:2018-9-20  来源:本站 本站原创,转载请注明出处

【成像系统】毒性化合物对神经系统相关作用的全方位测评方案

 

 

毒性化合物对神经系统相关作用的全方位测评方案

 

神经系统对许多毒性化合物以及自然环境中生成的有害物质非常敏感。在疾病发生过程中,神经毒性可以对大脑或者外周神经系统造成短暂或持续性的损伤,例如脊髓损伤、中风、创伤性脑损伤等,同时这种神经毒性也是造成很多神经退行性疾病诸如阿尔兹海默和帕金森的主要诱因。

诱导多功能干细胞技术在神经元毒性的研究中是非常重要的,iPSCs可以大批量被诱导培养和展示成熟神经元的功能。如果将这种独特的生物学相关的细胞类型和高通量成像分析结合在一起,我们就可以快速地筛选出在引起神经元毒性中起主导作用的化合物,从而大大减少临床前研究和相关动物实验的成本。

高通量分析是一种定量化的分析方法,其可以测量神经突触长度表征被测物的阳性或阴性作用。iPSC衍生的神经元细胞可以在3-5天内于96或者384孔板中形成神经元网络,然后用毒性化合物刺激48-72小时。神经网络被?-tubulin标记后,可利用ImageXpress® Micro 宽场成像系统获取图像。

 

 

上图:使用MetaXpress® 图像处理软件中Neurite Outgrowth模块和AcuityXpress™ 高内涵数据分析软件对相关图像和实验数据进行分析。 无论是否进行了细胞核复染色,Neurite Outgrowth模块都能找到神经细胞胞体,并根据这些荧光标记的神经细胞轴突将之标定为阳性细胞。神经细胞网络具有几个重要的特征参数包括轴突数目、轴突长度、每个细胞或者区域的分支数。我们可以针对每个孔的相关数据和细胞表型进行计算和统计。

 

 

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