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MD实验案例下载 | 斑马鱼等模式生物高通量筛选方法
点击次数:1264 发布日期:2018-8-31  来源:本站 本站原创,转载请注明出处

 

斑马鱼等模式生物的高通量筛选方法介绍

 

自从20世纪70年代美国俄勒冈大学的George Streisinger教授利用斑马鱼进行遗传学及发育生物学方面的研究以来,斑马鱼已越来越多地被应用于人类疾病的研究中。斑马鱼由于其与人类的高度生物相似性,成为了一种有用的药物开发模型。如专业从事斑马鱼临床前药物评价的Zygogen公司,使用ImageXpress系列高内涵筛选系统进行包括血管生成、毒性筛选等多个应用方向的药物评价,使用斑马鱼模型对化合物进行多浓度梯度的剂效关系的研究,并绘制需要至少十个以上样品才能准确拟合的Dose-Response曲线并计算得到IC50。此外,由于斑马鱼体积小,所以可以放入微孔板中用化合物处理,然后其表型能使用高内涵筛选系统来进行检测。

 

基于斑马鱼的体内实验应用有大量的已开发的人类疾病斑马鱼模型如:
1.代谢综合症:肥胖 (内脏肥胖)、 血脂异常、脂肪肝、糖耐受失调
2.人类癌症细胞异种移植:肿瘤血管生成、远端转移
3.循环疾病:心力衰竭、药物诱导的心率失调
4.中央神经系统失调:耳聋、视力障碍、嗅觉失调、癫痫、发育紊乱、睡眠唤醒障碍、肌营养不良 (ALS)

 

 

使用ImageXpress系列高内涵筛选系统来检测斑马鱼胚胎模型具备以下三个主要优势:
- 高效率:使用完整生命体在三维环境下几天就能评价成千上万的化合物
- 高灵活性:高内涵适合筛选很宽范围的疾病和毒性模型,甚至不局限于斑马鱼
- 高质量:通过自动化高速Z 堆叠拍摄从头到尾保持拍摄在最佳焦平面,避免景深带来的不清晰

 

 

 

参考文献:
1. Zhang, B., et al., Quantitative phenotyping-based in vivo chemical screening in a zebrafish model of leukemia stem cell xenotransplantation, PLoS One,2014 Jan 15; 9(1).
2. Umemoto, N., et al., Fluorescent-based methods for gene knockdown and functional cardiac imaging in zebrafish, Mol Biotechnol, 2013 Oct; 55(2): 131-42.
3. Kanungo, J., et al., In vivo imaging and quantitative analysis of changes in axon length using transgenic zebrafish embryos. Neurotoxicol Teratol, 2011 Nov-Dec; 33(6): 618-23.
4. Diekmann, H., et al., Characterization of optic nerve regeneration using transgenic zebrafish. Front Cell Neurosci, 2015 April 9; 9:118.
5. Huan, H., et al., High-throughput screening for bioactive molecules using primary cell culture of transgenic zebrafish embryos. Cell Rep, 2012 Sep 27;2(3):695-704.

 

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